阴道加德纳菌生物学的分型和药敏研究.pdfVIP

阴道加德纳菌生物学分型和药敏研究 王小龙，李文竹 兰州大学第二附属医院皮肤科，兰州（730030 ） E-mail ：liwzh@163.com 摘 要：目的 了解兰州地区阴道加德纳菌（GV ）的生物学分型和药敏。方法 采用Asmal 的诊断标准诊断细菌性阴道病（BV ），根据Briselden 方法对GV 进行生物学分型和传播途 径研究。采用微量稀释法进行药敏试验。 结果 BV 患者组GV 检出率52% ，非BV 患者组 GV 检出率 10%，两组检出率有显著性差异（p0.001 ）。共检出6 种生物型，BV 组与非 BV 组生物型分布有显著性差异（p0.001 ）。对GV 敏感的药物为：克林霉素、罗红霉素、 四环素和甲硝唑。结论 GV 的不同生物型与BV 发病相关。 GV 对传统药物敏感性不高。 关键词：细菌性阴道病；加德纳菌；生物学分型；药敏 细菌性阴道病（bacterial vaginosis , 简称 BV ）是育龄妇女最常见的阴道感染性疾病之 一，目前认为是由阴道菌群失调引起。虽然临床症状较轻，但由于治疗后易于复发，未经及 时的诊断治疗，其不良妊娠，盆腔炎和泌尿系感染的发生率可明显增高，对妇女的身心影响 更大。随着人们对 BV 发病机制的探讨进一步深入，GV 被认为是引起 BV 的主要病源菌之 一，可从 97-100%[1] 的BV 患者阴道分泌中分离到，且其致病性有显著性地区差异，为了探 讨 GV 的生物学分型、对药物敏感性并探讨GV 的传播途径，笔者对兰州地区 310 例门诊就 诊妇女阴道分泌物进行分析，报告如下。 1．材料和方法 1.1 病例选择 选择 2007 年 4 月～2008 年 1 月，在兰州大学第一医院妇产科、兰州大学第二医院皮肤 科、甘肃省人民医院妇产科门诊就诊的女性患者 110 例，年龄 18-45 岁，平均 32.7±3.2 岁， 临床出现下腹不适、性交痛、阴道分泌物异常、外阴瘙痒等症状的患者。符合以下条件：（1） 一周内无口服用药史者。（2 ）就诊前一周未进行阴道灌洗者。（3 ）就诊前一周未用过阴道 内置药物者。（4 ）非月经期及无阴道出血症状者。（5 ）非妊娠期妇女。健康对照组共200 例，为常规孕前检查或妇科体检者。年龄 22-55 岁，平均 38.5±4.3 岁。 1.2 试剂与仪器 蛋白胨：湖北省医药公司；小牛血清：上海生工生物有限公司；4- 甲基伞形油酸：sigma 公司；甲硝唑、克林霉素、环丙沙星、罗红霉素、四环素、头孢呋肟、氨苄西林原粉：中国 药物生物制品检定所。 2 试验方法 2.1 BV 的诊断：根据Asmal 的诊断标准[2] （1）均匀稀薄的阴道分泌物。 （2 ）阴道分泌物pH4.5 。 （3 ）胺试验阳性。 （4 ）阴道分泌物涂片镜检线索细胞阳性。 - 1 - 以上4 项有 3 项阳性即可诊断为细菌性阴道病。其中第四项是必备的。 2.2 取材 将 2 支无菌长棉拭子用无菌生理盐水浸湿，借助阴道窥器，擦取阴道分泌物，避免触及 [3] 宫颈区 。 2.3 固体培养法 [4] （1）基础培养基 ：多价蛋白胨 5g、胰胨 5g、牛肉膏 5g、酵母膏 3g、氯化钠 5g、L-半光 氨酸 0.5g、葡萄糖 0.5g、琼脂20g 、水 1000ml。将上述成分混匀溶解调pH 值至 6.5-6.6 。（2 ） 分离培养基：将上述基础培养基于 121℃高压灭菌 20 分钟，冷至 50℃ 时加 4mg/L 硫酸庆 大霉素，30mg/L 萘啶酸，2mg/L 两性霉素 B ，无菌吐温 80 （7.5mg/L ），小牛血清20%及人 血 5%倾注平板。 2.4 初步鉴定 （1）典型菌落形态。（2 ）β-溶血环。（3 ）革兰染色阴性短杆菌至球菌。（4 ）氧化酶和触 媒试验阴性。 2.5 生化鉴定[5] 将纯化的菌落用灭菌生理盐水制成浓的菌悬液，滴加入淀粉、麦芽糖、甘露糖、棉籽糖