气相色谱GC分析条件优化课件.pptVIP

GC分析条件的优化 ;色谱基本理论 ;;理论塔板数N=5.545(tR/WH/2)=L/HETP; 理论塔板数N 表示柱效的参数 N越大，柱效越高 理论塔板高度(HETP) 表示柱效的参数（与柱长无关） H越小，柱效越高;A ： 涡流扩散项（多途径造成） B ： 纵向扩散项 C: 传质阻力项 ;Van Deemter方程式;?分配系数K和分配比k 分配系数是指在一定温度和压力下，组分在固定相和流动相之间分配达平衡时的浓度之比值，即 ;分配比又称容量因子，它是指在一定温度和压力下，组分在两相间分配达平衡时，分配在固定相和流动相中的质量比。即 ;?选择因子α 对A、B两组分的选择因子，用下式表示 ; 分离度R又叫分辨率，定义为相邻两组分色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽总和之半的比值，即 ;R值越大，表明相邻两组分分离越好。 当R＜1时，两峰有部分重叠； 当R＝1时??分离程度可达98％； 当R＝1.5时，分离程度可达99.7％。 通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志。 ;下图表示了不同分离度时色谱峰分离的程度;基本色谱分离方程式 ;?影响分离度的因素 ?分离度与柱效的关系 ?分离度与选择因子的关系 ?分离度与容量因子的关系 ;?分离度与柱效的关系 由分离方程式看出，对于一定理论板高的柱子，分离度的平方与柱长成正比，即 ;?分离度与选择因子的关系 α大，选择性好。一般通过改变固定相和流动相的性质和组成或降低柱温，可有效增大α值。 ;?分离度与容量因子的关系 ;色谱柱的介绍;填充柱;毛细柱 柱材：熔融石英、铝 内径：0.2mm--0.53mm 长度：10--100m 固定相种类：OV-1，PEG- 20M，OV-17等 固定相膜厚：0.2--5μm ;毛细柱主要类型;毛细管柱管材;固定相;固定相－聚甲基硅氧烷;固定相－聚乙二醇;;固定液流失;;固定液极性的选择（按相似相溶原则） 非极性固定液------有按沸点顺序溶出倾向 极性固定液------沸点相同时，按极性由小到大 的顺序溶出 固定液的浓度或毛细管柱的膜厚 对低沸点化合物 高浓度（10%～30%) 高膜厚(1～5μm) 对高沸点化合物 低浓度（1%～5%) 低膜厚(0.25～0.5μm) ;Squalane 0 （非极性） PEG20M(DBWAX) 322（强极性） SE30 15 FFAP 340 OV101(DB1) 17 PEG1000 347 SE54(DB5) 33 （弱极性） EGA 372 DC550 74 DEGS 484 OV17 119（中极性） TCEP 593 （超强极性） BCEF 690;0.22mm x 25m;CBP1-W25-100 膜厚 1um;内径;毛细管柱流量设定;各公司常用毛细柱商品名及固定液对照表;为什么必须进行色谱柱老化？ 新色谱柱含有溶剂和高沸点物质，所以基线不稳，出现鬼峰和噪声；旧柱长时间未用，也存在同样问题。一般 采用升温老化，即从室温程序升温到最高温度，并在高温段保持数小时。 新柱老化时，最好不要连接检测器。 每天都要进行老化吗？ 视仪器基线情况，确定是否需要老化以及老化时间。;色谱柱效率：峰尖 评价：理论板高(HETP)、理论塔板数(N) 对策：将Van Deemter 各因素优化 选择性：峰的分离度 评价：分离因子或分离度 对策：选择极性相当的固定相 峰的对称性：吸附现象 评价：拖尾因子 对策：色谱柱进一步老化 ; 分析方法 计算方法;分析参数 选择分析系统: 进样方式、色谱柱等 GC参数: 载气流量、分流比、温度条件等;进样口温度 考虑样品中各组分的沸点，设定温度使样品瞬间汽化。 色谱柱温度 考虑样品中各组分的沸点，及希望的分析周期， 宽沸程样品应使用程序升温。 检测器温度 防止检测器污染，一般比色谱柱温度高20-30℃。 DET.T≥INJ.T≥COL.T+20℃;;恒压力 恒线速;0.1mmI.D.，df=0.1μm，k=3.5;线速度（cm/sec）; 0.25mmID x 30m , df=0.25μm He　:　150kPa,2.32mL/min,45.1cm/sec;恒圧控制方式;「恒线速度控制方式」 GC 和 GC/MS 的保留时间一致;采用「恒线速度方式」GC和GC/MS的保留时间保持一致。; 1.GC分离条件的优化 2. MS参数的选择 ;离子源温度 接口温度