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扬子鳄Sox及DMRT基因的研究

―1- 扬子鳄Sox 和DMRT 基因的研究 摘 要 本文由文献综述和研究报告两部分组成 一、文献综述 1、从Sox 基因的发现、特点及功能三个方面概述Sox 基因的研究现状。 Sox 基因含有一个能与DNA 特异结合的高度保守HMG-box 基序。在个体发 育过程中,该基因广泛参与了动物的性别决定及多种组织器官的形成。 2 、从DMRT 基因的发现及功能等方面综述DMRT 基因的研究进展。 DMRT 基因是一类新发现的含有DM 保守盒的转录调控因子。该基因参与 调节动物的性别决定与分化等过程。 3 、综述了Sox 基因与DMRT 基因在性别决定中的相互作用关系。 二、研究报告 1、参照人SRY 基因HMG-box 保守区的序列,设计一对兼并引物,扩 增了扬子鳄的 Sox 基因,并对扩增产物进行了克隆与测序。结果在雌雄中 均筛选出8 个不同的Sox 基因,长度均为216bp ,无性别特异性。其DNA 序列和编码的氨基酸序列与人相应 Sox 基因的相似性分别为 88%、88%、 88%、89%、87%、93%、87%、93%和 91%、91%、91%、96%、100%、 98%、94%、96%。显示出进化上的高度保守性。 2 、参照人DMRT1 基因DM 盒保守区的序列,设计一对特异引物,扩 增了扬子鳄的DMRT1 基因,并对扩增产物进行了SSCP 分析和测序。结果显 示:(1)扬子鳄 DMRT1 基因的扩增片段与人 DMRT1 基因扩增片段的大小相 同,均为140bp ;(2)雌雄扬子鳄DMRT1 基因扩增片段大小虽然与人相同,但 其单链迁移率与人有较大差异,而雌雄个体间无差异。(3)测序结果表明,雌 雄扬子鳄DMRT1 基因的序列一致,且其DNA 序列和编码的氨基酸序列与人 相应DMRT1 基因的相似性分别为87%和95%。显示出高度的保守性。 本研究为探索扬子鳄的性别决定机制、Sox 基因与DMRT 基因的功能 及其进化等提供了分子资料。 关键词:扬子鳄;Sox 基因;DMRT 基因;PCR-SSCP;克隆;测序 ―2- Studies on the Sox and DMRT gene of Alligator sinensis Abstract This paper consists of two parts,which are as follows: PART ONE: reviews 1. The discovery,characteristic and function of Sox genes were discussed . Sox genes encode a group of proteins that carry a DNA-binding HMG domain. In various phages of embryonic development, Sox genes play a key role in sex-determining and in organism formation. 2. The findings and function of DMRT gene were reviewed. DMRT genes are a kind of transcription factor which possesses a common motif called the DM domain. DMRT genes are considered to be involved in sex determination and sex differentiation. 3. The interaction between Sox genes and DMRT genes in sex determining and sex differentiation was discussed. PART TWO: studies 1. After a pai

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