纳米氧化钛导致小鼠肾损伤的分子机制探究.pdf

纳米氧化钛导致小鼠肾损伤的分子机制研究 中文摘要 中文摘要 纳米二氧化钛(TiO ) 因具有独特的光催化特性、耐化学腐蚀性和热稳定性，已 2 广泛应用于化妆品、涂料、食品添加剂、空气净化、废水处理、杀菌等领域。因 此，纳米TiO2 将不可避免地进入环境并通过不同的途径进入人体，引起相应的毒 理学效应，其对人体的潜在毒性已引起科学界的高度关注。作为纳米颗粒作用的 重要靶器官，纳米TiO2 对肾脏的损伤作用值得深入研究。目前，国内外已开展纳 米TiO2 暴露引起的肾毒性的研究，但对其分子机制的研究尚未深入。因此，本论 文主要研究纳米 TiO2 低剂量长期暴露对肾脏的毒性损伤作用及其可能的分子机 制，为制定纳米TiO2 使用安全标准和评价纳米TiO2 生物学效应提供了重要的理论 依据。 论文主要涉及以下内容： （1）纳米TiO2 可导致小鼠肾脏发生炎症反应，但其作用机制仍不清楚。在本 研究中，以不同剂量（2.5 、5 和 10 mg/kg）的纳米TiO2 对小鼠持续90 天灌胃处 理，分析肾脏中核转录因子–κB （NF–κB ）、肿瘤坏死因子–α （TNF–α ）、巨噬细 胞移动抑制因子(MIF)、白细胞介素-2 （IL–2 ）、白细胞介素-4 （IL-4 ）、白细胞介 素-6 （IL-6 ）、白细胞介素-8 （IL-8 ）、白细胞介素-10 （IL-10）、白细胞介素-18 （IL-18）、白细胞介素-1β （IL-1β）、交叉反应蛋白(CRP)、转化生长因子(TGF-β)、 干扰素(INF-γ) 、细胞色素P450 1A1(CYP1A1)及热休克蛋白70 （HSP70 ）的表达水 平，并测定肾功能生化指标，评估肾组织病理变化。结果表明，纳米TiO2 颗粒在 肾脏中积累，导致肾炎症、细胞坏死和肾功能紊乱。RT-PCR 和 ELISA 结果进一 步表明纳米TiO2 可诱导小鼠肾脏中NF–κB 、TNF–α、MIF 、IL–2 、IL-4 、IL-6、IL-8、 IL-10、IL-18、IL-1β、CRP、TGF-β、INF-γ 和CYP1A1 表达的显著增加，却抑制 了HSP70 的表达。这些结果表明，纳米TiO2 引起的小鼠肾损伤可能与炎症相关因 子表达的改变及肾脏对纳米TiO2 解毒作用的降低有关。 （2 ）为了进一步研究纳米 TiO2 导致肾损伤的分子机制，本研究以不同剂量 （2.5 、5 和10 mg/kg）的纳米TiO2 对小鼠持续6 个月灌胃处理，分析肾脏的生化 功能指标、病理学变化、氧化胁迫水平、谷胱甘肽水平以及与氧化炎症相关基因 I 中文摘要 纳米氧化钛导致肾损伤的分子机制研究 表达水平的变化情况。结果显示纳米TiO2 长期暴露后小鼠的肾脏出现明显的活性 氧积累及脂质、蛋白质和DNA 的过氧化，同时伴随肾功能的紊乱、炎症细胞的浸 润、脂肪变性和细胞的凋亡等病变。纳米TiO2 抑制基因Nrf2 和Nrf2 靶基因产物 如血红素加氧酶1、谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基和谷胱甘肽S-转移酶的表达， 降低总谷胱甘肽的含量，同时促进氧化炎症相关基因产物如 NAD （P ）H 氧化酶 亚基（NOX4 ）、环氧合酶-2 和核因子-κB （NF-κB ）的表达。这说明长期纳米TiO2 暴露可导致小鼠肾的氧化和炎症损伤。 （3 ）纳米TiO2 能在肾脏中积累并导致一系列的损伤，但肾损伤的多基因共同 作用的分子机制却知之甚少。因此将小鼠通过连续90 天的10 mg/kg TiO 纳米TiO 2 2 灌胃后，利用全基因组基因芯片技术研究肾脏基因表达的变化情况。结果表明纳 米TiO2 在肾中积累导致小鼠体重下降、肾指数增加和肾组织中营养元素分布失衡， 同时导致肾组织中肾小球数量