犬弓首蛔虫雄虫犮犇荦犃文库构建及犈牦犜分析 - 畜牧兽医学报.pdf

畜牧兽医学报 ， （）： ２０１２４３４ ６０９６１４ 　 犃犮狋犪犞犲狋犲狉犻狀犪狉犻犪犲狋犣狅狅狋犲犮犺狀犻犮犪犛犻狀犻犮犪 犬弓首蛔虫雄虫犮犇犖犃文库构建及犈犛犜分析 马光旭，周 琪，魏志鹏，王德恒，陈昱鸣，周荣琼 　 （西南大学 荣昌校区动物医学系，荣昌 ４０２４６０） 摘 要：为构建 犜．犮犪狀犻狊雄虫 ｃＤＮＡ文库，采用 Ｔｒｉｚｏｌ法提取 犜．犮犪狀犻狊雄虫的总 ＲＮＡ，合成 ｃＤＮＡ，连接到 　 ＴｒｉＥｘ２载体上，通过包装蛋白对连接产物的包装，接种到大肠杆菌 ＸＬ１Ｂｌｕｅ中进行原始文库和扩增文库的滴 λ ｐ 度测定。经质量鉴定表明：初始文库的滴度为 ６ · －１，扩增后文库的滴度为 ９ · －１。 ５．２５×１０ ｆｕ ｍＬ ６．９０×１０ ｆｕ ｍＬ ｐ ｐ 文库的插入片段大小在 ５００ ２０００ｂ，平均片段大小为１０００ｂ，重组率为９９．４７％。所有指标均显示已成功构建 ～ ｐ ｐ 了 雄虫的 文库。利用该文库获得了 条 有效表达序列标签（ ）。对 拼接后代表了 犜．犮犪狀犻狊 ｃＤＮＡ １８９ ５′ ＥＳＴ ＥＳＴｓ 个 ，含有 个 和 个 。其 在 中的序列号为 １０１ Ｕｎｉｅｎｅｓ ２７ Ｃｏｎｔｉｓ ７４ Ｓｉｎｌｅｔｏｎｓ Ｕｎｉｅｎｅｓ ＧｅｎＢａｎｋ ＨＯ３４８１９５～ ｇ ｇ ｇ ｇ 。同源性分析检索到有 个 与已知基因同源，其中具有已知或推测功能的基因有 个，未知 ＨＯ３４８２９５ ５６ Ｕｎｉｅｎｅｓ ４０ ｇ 功能基因有 个，未比对上的基因 个。未比对上的基因与 数据库中的蛋白序列没有任何意义的匹配，为研 １６ ４５ ＮＲ 究中发现的新基因。这些结果为进一步开展犬弓首蛔虫功能基因及分子机制研究奠定了基础。 关键词：犬弓首蛔虫；雄虫； 文库；表达序列标签（ ） ｃＤＮＡ ＥＳＴ 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｓ８５２．７３ Ａ ０３６６６９６４２０１２０４０６０９０６ 　　　　 　　　　 犆狅狀狊狋狉狌犮狋犻狅狀狅犳犪犮犇犖犃犔犻犫狉犪狉犳狉狅犿犕犪犾犲犃犱狌犾狋犜狅狓狅犮犪狉犪犮犪狀犻狊犪狀犱 狔 （ ） 犃狀犪犾狊犻狊狅犳犈狓狉犲狊狊犲犱犛犲狌犲狀犮犲犜犪 犈犛犜 狔 狆 狇 犵