蒙医温针疗法对哮喘大鼠模型病理学改变的观察.docVIP

　　蒙医温针疗法对哮喘大鼠模型病理学改变的观察 --支气管哮喘,是一种发生频率极高的呼吸系统疾病,这类慢性气道炎症由肥大细胞#65380;T细胞及嗜酸性粒细胞等多种细胞及其成分直接或间接参与的气道慢性非特异性炎症#65377;支气管哮喘是严重危害人民群众健康的常见病,多发病#65377;根据世卫组织统计,全球哮喘患者已经突破3亿以上人,且儿童的发病率较高,21世纪中叶之后以老年人群中哮喘发病率亦呈上升趋势#65377;数十年来,对支气管哮喘的治疗进展缓慢,在现阶段,温针防治哮喘的临床研报道日益增多;我们在临床上采用温针治疗哮喘,取得了较好疗效#65377; 目前临床多采用激素(地塞米松)可缓解哮喘临床症状,目前认为地塞米松影响Eos(嗜酸性粒细胞)浸润的主要机制为抑制Eos(嗜酸性粒细胞)的趋化和诱导Eos(嗜酸性粒细胞)凋亡#65377;地塞米松可作为多种炎症介质释放的抑制剂,而其中许多介质可诱导Eos(嗜酸性粒细胞)的趋化,如PAF(血小板活化因子)#65380;IL-5(白介素-5)等#65377; 上皮细胞是Eos(嗜酸性粒细胞)趋化因子的主要,亦是激素的主要IE细胞,其可使上皮细胞因子的表达显著下降#65377;而温针治疗的干预机理目前主要机制为抑制Eos(嗜酸性粒细胞)的趋化和诱导Eos(嗜酸性粒细胞)凋亡有关,温针治疗支气管哮喘机理与激素治疗哮喘相似,尚待今后进一步的研究#65377; 1材料与方法 1.1实验动物: 由昆明医学院动物实验中心提供的体重(250~300)g左右的健康大鼠,雌雄各半,共40只#65377;随机分成正常对照组(空白组),阳性对照组(模型组),温针组(治疗组),西药组(地塞米松组)共4组,每组各10只#65377;采用40只健康大鼠,雌雄各半,随机分成4组:正常对照组(空白组),阳性对照组(模型组),温针组(治疗组)#65380;西药组(地塞米松组),每组10只#65377;后3组造支气管哮喘模型,正常对照组给予生理盐水激发#65377;造模成功后,分别给以相应的治疗#65377;大鼠麻醉后处死,组织病理切片送实验室进行病理学改变观察#65377; 1.2材料 1.2.1主要试剂: 卵清白蛋(OVA)(美国Sigma公司),水合氯醛:天津市科密欧化学试剂有限公司;40%甲醛:广州化学试剂厂;1%盐酸:广州化学试剂厂;1%稀氨水:广州化学品试剂厂;二甲苯:天津市富宇精细化工有限责任公司;无水磷酸氧二钠:广州市番禹强化工厂;PBS缓冲液:赛默飞世尔生物化学制品有限公司;自制10%中性缓冲福尔马林固定液:10ml 40%甲醛溶液+90ml PBS缓冲液(PH=7.2);其余试剂均化验室提供#65377; 1.2.2主要仪器设备: 医用超声雾化器(CS2135;光学显微镜Olympus U-PMTVC;尼康D90单反摄像机(Ni-kon);MLY-Ⅰ型蒙医疗术温针仪(内蒙古医学院蒙医药学院研制,专利号ZL201120058078.0);特制蒙医银针(0.5mm×30mm,内蒙古元阳中蒙医科技开发有限责任公司提供)#65377; 1.3实验步骤 1.3.1参照OVA致敏法制备大鼠哮喘模型 将40只健康大鼠随机分为空白组#65380;阳性对照组(模型组)#65380;温针组(治疗组)#65380;西药组(地塞米松组),每组10只#65377;用10%的卵清白蛋白生理盐水1ml腹腔注射,2周后将致敏大鼠放入半密闭的玻璃钟罩内,以超声雾化器喷1%的卵清白蛋白溶液雾化吸入20min,以大鼠腹肌出现明显收缩(用力呼吸的标志),呼吸频率增快#65380;鼻翼煽动为阳性,连续14天,每天1次,#65377;阳性对照组#65380;温针组,西药组均按此方法复制哮喘大鼠模型#65377; 1.3.2穴位选择:穴位的定位参照《蒙医传统疗法》赫依穴#65380;母肺穴#65380;子肺穴分别取第1#65380;4#65380;5胸椎上凹正中处#65377; 1.3.3实验方法 1.3.3.1空白组:不给予任何处理,至第30天开始予蒸馏水2ml/只灌胃#65377; 1.3.3.2阳性对照组(模型组): 制备哮喘气道重建模型,使大鼠处于致敏状态14天#65377;自第15天起幵始雾化吸入1%卵清蛋白生理盐水溶液以激发支气管哮喘,隔日1次,每次激发时间为20分钟#65377; 1.3.3.3治疗组(温针组): 哮喘气道重塑模型大鼠,于注射抗原液第15天开始温针刺激,每次温针治疗均在雾化前进行#65377;穴位选取“赫依穴”“母肺穴”“子肺穴”,将大鼠固定后,用特制银针(直径0.5mm,长度3 cm)斜刺后,再接蒙医温针仪,电流强度为100mA,温度为40℃,留针15min隔日1次,7次1疗程,2疗程后取材检验#65377;