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实验三 霉菌、放线菌与土壤微生5
实验三 霉菌、放线菌的形态观察及微生物的分离纯化 ;一、实验目的;二、实验原理; 霉菌:凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网形丝状菌体的真菌,统称为霉菌。霉菌包括分类学上许多不同纲或类的真菌,它们分别属于藻状菌纲、子囊菌纲、担子菌纲和半知菌类。霉菌菌丝分为有隔菌丝和无隔菌丝两类.;黑曲霉;青霉;根霉;三、实验材料;主要观察黑曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况(辨认顶囊、分生孢子梗、足细胞和分生孢子);插片法培养放线菌
取插片一片,直接在显微镜下进行观察,注意分界面两侧菌丝形态的差异
观察放线菌气生菌丝和基内菌丝、孢子丝的区别
;五、实验结果;六、思考题;实验(二)、 从土壤中稀释分离微生物
一、实验目的:
学习微生物稀释平板计数及划线分离技术
二、实验原理:
采用适宜(选择)培养基和培养条件,或加入某种抑制剂有利于目标微生物的生长,从而分离获得目标微生物的纯培养:常用稀释平板分离法和划线分离法
在固体培养基上形成单个菌落。
分离细菌用牛肉膏培养基,分离真菌用马丁-孟加拉红培养基。
依据一个单细胞在固体培养基上培养后可以长成一菌落从而推算样品中含有多少细菌或真菌的活菌数目
;分离细菌的同学(1-4组)取一瓶牛肉膏培养基(250ml/ 瓶)熔化后倒12个平皿。
分离真菌的同学(5组)取一瓶马丁培养基(250ml/瓶)熔化后,置水浴锅中55℃保温,于无菌台上加链霉素和孟加拉红各1ml,混匀后倒12个平皿。; ;(五)平板涂布;(六)吹干
将已涂布好的平皿皿盖半揭开,置于无菌台上吹干。
(七)培养:
待吹干后,将平板用报纸包好(每个平板方向一致),写上班级和姓名,皿底朝上,置于培养箱培养(温度?) 。
(八)检查结果;结果分析:
1. 我所涂平板种类: (牛肉膏或马丁氏)
2. 计数:牛肉膏平板取单菌落数目在30~300个左右的稀释度来计数,马丁氏平板取单菌落数目在10~100个左右的稀释度来计数
3.我所计数的平板稀释度是: 单菌落数目: 、 、 。
4.计算:活菌数目/每克土壤= (计算过程)= 个/每克土壤
5. 对你和同伴的细菌及真菌计数结果进行分析;平皿划线分离法;试管斜面接种;实验报告
从土壤中稀释分离微生物的原理、方法、步骤。
2.思考题
(1)为什么融化后的培养基要冷却至45℃左右才能倒平板?
(2)要使平板菌落计数准确,需要掌握哪几个关键?为什么?
(3)试比较平板菌落计数法和显微镜下直接计数法的优缺点及应用。
(4)当你的平板上长出的菌落不是均匀分散的而是集中在一起时,你认为问题出在哪里?
(5)用倒平板法和涂布法计数,其平板上长出的菌落有何不同?为什么要培养较长时间(48h)后观察结果?;本次实验课结束请确保油镜头擦拭干净!
所用器皿自己洗净!做清洁的同学要清理无菌台!下周再见!;实验要求
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