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2.Mayer苏木精改良配法 ????A液 　????苏木精2g 　????无水乙醇40ml ????B液 　????硫酸铝钾100g 　????蒸馏水600ml 　????稍加热使硫酸铝钾在水中溶解，将苏木精溶于酒精中，再将A液与B液混合煮沸2min。用蒸馏水补足600ml，加入400mg碘酸钠充分混匀，苏木精染液呈紫红色。 3.Gill改良苏木精染液的配制 ??????苏木精2g ??????无水乙醇250ml ??????硫酸铝钾17g ??????蒸馏水750ml ??????碘酸钠0.2g ??????冰醋酸20ml ????先将苏木精溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水中。两液溶解后将其混合，加入碘酸钠待苏木精氧化成紫红色，再加入冰醋酸。 2.伊红Y的的化学性质 伊红Y是煤焦油染料中的一种钠盐和溴盐的酸性染料，即四溴荧光素二钠盐，呈深红色带微蓝色粉末。为胞浆最好的染料，是胶原纤维、肌原纤维及嗜酸性颗粒常用染料。 ?1.水溶性伊红 ??????伊红Y0.5~1g ??????蒸馏水100ml ????先将水溶性伊红加入蒸馏水中，用玻璃棒将伊红搅起泡沫后过滤，每100ml加冰醋酸1滴。 2.乙醇性伊红液的配制 ??????伊红Y?0.5~1g ??????90%酒精100ml ????先将伊红溶于酒精中，用玻璃棒研碎溶解后，每100ml加冰醋酸1滴。用乙醇性伊红液染细胞浆后不可经水洗直接用85%酒精脱水。 伊红溶液的配制 3.H-E染色的步骤方法 1次 普通水洗 水洗 8 10-30s 　 盐酸酒精分色 7 1次 普通水洗 水洗 6 10-15m 染核 苏木素染色 5 1次 蒸馏水洗 2次 普通水洗 水洗 4 3-5m 去汞 碘酒精 3 1-2m 50%酒精 1-2m 70%酒精 1-3m 80%酒精 3-5m 95%酒精 10m 100%酒精 入水 2 10-15m 二甲苯II 10-15m 二甲苯I 脱蜡 1 　 　 镜检 16 　 中性树胶 封片 15 10-15m 二甲苯II 10-15m 二甲苯I 透明 14 10-15m 100%酒精II 10-15m 100%酒精I 1-2m 95%酒精II 1-2m 95%酒精I 脱水 13 10-15m 0.5-1%伊红 伊红染色 12 1-2m 80%酒精 1-2m 70%酒精 1-2m 50%酒精 脱水 11 10-15m 　 充分水洗 10 　 促进蓝化 氨水 9 4.盐酸乙醇的配制 浓盐酸1ml加入70%的乙醇99ml 5.氨水的配制 氨水1ml加入99ml蒸馏水 6.中性树胶的配制 封片多用中性树胶或加拿大树胶，一般用二甲苯和中性树胶配制。 中性树胶：二甲苯约4:3 标准： 用玻璃棒蘸取混合液，液体能分滴滴落而不连成线为最佳。 0.01MPBS简易配法：1000ml蒸馏水中分别加入0.39g NaH2PO4·2H2O 、2.68g NaH2PO4·2H2O 、8.5g NaCl。 A液：0.2M磷酸二氢钠液： NaH2PO4·2H2O 31.2g溶入1000ml蒸馏水 B液：0.2M磷酸氢二钠液： Na2HPO4·7H2O 53.6g溶入1000ml蒸馏水 0.2M PBS配制：取19 mlA液和81 mlB液充分混合。 0.01M PBS配制：0.2MPBS 50ml，NaCl 8.5g，定容至1000ml。 7.PBS缓冲液的配制 8.H-E染色的注意事项 切片用二甲苯脱腊，应视不同的季节有不同的脱蜡时间，在夏天，室温较高，脱蜡较迅速，往往在2-3min就可脱蜡干净，在冬季，时间应相对延长。 切片在进入二甲苯前，可用电吹风吹切片，使切片上的蜡处于熔解状态，这样脱蜡较迅速，尤其是冬天，此法更可行。 切片上的蜡一定要清除彻底干净，否则将影响染色，造成切片染色不均的现象。 盐酸酒精分化切片，浓度有0.25%,0.5%和1%，根据各人的情况而使用。这一步主要是将过染的颜色及不该染的染色去除掉，此法要掌握得当，必须靠经验，核的染色清楚与否靠分化这一招，分化过度，核染色淡，分化不足，核染色质一团，分不清。初学者应于显微镜下控制分化程度。 水洗蓝化，也可用温热水来促使切片蓝化，可用氨水，碳酸锂等化学药品来促蓝，虽然如此，自来水冲洗蓝化切片是最好的，这对于切片的保存较为有利。 掌握苏木素染液中的最佳染色时间比较困难，因为各种组织都有不同的染色时间，核的染色时间从30sec至15min不等。对于核的染色，为了充分地显示各种核染色质，过染比染色时间短效果会更好。 石蜡分为软蜡和硬蜡，熔点为45℃-54℃的称软蜡，56℃ -58℃或60℃以上的称硬。 由于石蜡冷凝后脆性较大，可加入一定的黄蜂蜡增加韧性（蜂蜡与石蜡的比