第16章 色谱分离原理.pptVIP

峰面积的测量方法 峰高乘半峰宽法 A = 1.065 h Y1/2 峰高乘平均峰宽法 A = h (Y0.15+Y0.85)/2 (不对称色谱峰） 积分仪（色谱工作站） 定量校正因子 （1）绝对校正因子 绝对校正因子受仪器及操作条件的影响大，不易准确测定 定量校正因子 （2）相对校正因子 组份i 与基准物 s的绝对校正因子之比 常用基准物：苯（热导池检测器） 正庚烷（氢焰检测器） 几种常用的定量计算方法 归一化法 内标法 内标标准曲线法 外标法 归一化法 要求：试样中所有组分都能流出色谱柱 优点：简便、准确；进样量、流速等操作条件对分析结果影响较小 内标法 将一定量的试样中不含有的纯物质作为内标物，加入准确称取的试样中，根据被测物和内标物的质量及其在色谱图上相应的峰面积比，求出某组分的含量。 特点： 适合于所有组分不能全部出峰的试样 操作条件变化引起的误差小，分析结果较准确 内标法计算公式 试样中不存在的纯物质 加入的量应接近被测组分 要求内标物的色谱峰位于被测组分附近，或几个被测组分色谱峰之间，并与这些组分完全分离 内标物与被测组分的物理及物理化学性质相近 内标物的选择 作业 P509: 18- 5, 7, 9, 20 P546: 19- 4, 10, 14 P593：20- 2，4，5 * 油性溶剂中含有的少量水和一定量的表面活性剂分子，这些双亲性的分子形成球形胶束（一般，也可能是其他形貌），可以理解为很小的水核。水在油中，Water in Oil, W/O, 为反相胶束； O/W 为正相胶束。反相胶束法就是利用水核的纳米尺寸，以及水核的相互碰撞交换，相当于纳米反应器中进行反应。 分配系数------溶解度 * ?K越大，两种物质的色谱峰分得越开。 * * 调整保留时间：溶质在固定相中停留的总时间 * 死体积: 色谱柱中不被固定相占据的空间以及进样系统管道和检测系统的总体积 保留体积: 从注射样品到色谱峰顶出现时，所通过色谱系统的流动相体积 * 相对保留值 （reative retention）在一定色谱条件下被测化合物和标准化合物调整保留时间之比。由于保留值（时间或体积）随色谱分离条件变化，因此不能直接用于定性分析，需要参考水准，类似于电化学中的参比电极电位。 很多文献用分离因子 （Spearation factor）α来表示相对保留值， * 成功点： 流出曲线的形状 浓度极大点的位置 计算和评价柱效能的指标（n, H) 不足： 无法回答的问题 实验参数如填料的大小、分子结构、温度等对色谱峰形以及塔板数和塔板高度的影响 理论塔板高度与流速有关 二、 速率理论-影响柱效的因素 1. 速率方程（也称范.弟姆特方程式） H = A + B/u + C·u H：理论塔板高度， u：载气的线速度(cm/s) 减小A、B、C三项可提高柱效； 存在着最佳流速； A、B、C三项各与哪些因素有关？ A─涡流扩散项 A = 2λdp dp：固定相的平均颗粒直径 λ：固定相的填充不均匀因子 固定相颗粒越小dp↓，填充的越均匀，A↓，H↓，柱效n↑。表现在涡流扩散所引起的色谱峰变宽现象减轻，色谱峰较窄。 B/u —分子扩散项 B = 2 νDg ν ：弯曲因子，填充柱色谱，ν1。 Dg：试样组分分子在气相中的扩散系数（cm2·s-1） (1) 存在着浓度差，产生纵向扩散; (2) 扩散导致色谱峰变宽，H↑(n↓)，分离变差; (3) 分子扩散项与流速有关，流速↓，滞留时间↑，扩散↑; (4) 扩散系数：Dg ∝(M载气)-1/2 ； M载气↑，B值↓。 k为容量因子； Dg 、DL为扩散系数。 减小担体粒度，选择小分子量的气体作载气，可降低传质阻力。 C ·u —传质阻力项 传质阻力包括气相传质阻力Cg和液相传质阻力CL即： C =（Cg + CL） 2.载气流速与柱效——最佳流速 载气流速高时： 传质阻力项是影响柱效的主要因素，流速?，柱效?。 载气流速低时： 分子扩散项成为影响柱效的主要因素，流速?,柱效? 。 H - u曲线与最佳流速： 由于流速对这两项完全相反的作用，流速对柱效的总影响使得存在着一个最佳流速值，即速率方程式中塔板高度对流速的一阶导数有一极小值。 以塔板高度H对应载气流速u作图，曲线最低点的流速即为最佳流速。 3. 速率理论的要点 (1)组分分子在柱内运行的多路径与涡流扩散、浓