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第四章 细菌的遗传分析 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 第四章 细菌的遗传分析 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 1. F 因子 阿德伯格(Adelberg)和伯恩斯 (Burns)[1959]： F 因子偶尔在环出时不够准确，会携带出染色体上的一些基因，这种因子称为F因子。 　 F因子携带染色体的节段大小：从一个标准基因到半个细菌染色体。 (六)、F 因子与性导 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 ⑴. F因子转移基因频率极高，如同F因子转移频率； ⑵.F因子携带与细菌染色体一样的同源区段，自然整合率极高， 并且整合在一定的座位上， 而正常F因子可在不同座位整合。 (3).整合过程可逆，即可通过环出，完整的F因子重新离开染色体。 F 因子的特点： 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 性导：指接合时由F因子所携带的外源DNA整合到细菌染色体的过程。 2. 性导 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 雅各布(Jacob)和阿德伯格(Adelberg) 发现： 　　特殊的Hfr菌株能把lac+ 等位基因高频率地转移到F- lac- 受体中(lac基因位于远端，中断杂交实验中只有1/1000重组率)； 原因：由F携带lac+ 基因进入受体后可在lac位点上形成部分 　　　二倍体F　lac+ / lac-。 2. 性导 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 性导在大肠杆菌遗传研究中的作用： ①. 分离出大量F因子（每个F因子携带有不同大肠杆菌 基因） è 利用不同基因在一起的并发性导的频率来 作图； ②.性导形成的部分二倍体可用作互补测验 è 确定两个 突变类型是否属于同一个基因。 ③.通过性导产生部分二倍体 è 确定等位基因的显 隐性关系； 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 接 合 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 四、E.coli 的转化 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 (一)、转化现象的发现 概念：某些细菌通过其细胞膜摄取周围供体的染色体 　　　片段，将此外源DNA片段通过重组整合到自己 　　　染色体的过程。 1928年，格里菲斯（Griffith F.） 　　在肺炎双球菌中发现转化现象。 1944年，艾弗里（Avery O. T.） 　　进行肺炎双球菌转化试验； 　　证实遗传物质是DNA； 　　转化是细菌交换基因的方法之一。 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 1. 受体细胞处于感受态 感受态：指细菌能够从周围环境吸收DNA分子的生理状态； 2. 供体DNA与受体细胞结合(可逆) 结合发生在受体细胞特定部位(结合点)； 对供体DNA片段有一定要求(不大于20000个核苷酸对）； 3. DNA摄取(不可逆) 当细菌结合点饱和之后，细菌开始摄取外源DNA； 一条DNA单链进入细胞，另一条链在膜上降解； (二)、转化过程 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 5.整合(重组) 4.联会 同源位点配对，亲缘关系越远，联会越机率小、转化的可能性越小。 是指单链的转化DNA与 受体DNA对应位点的置换?? 稳定地进入到受体DNA。 　　对同源DNA具有特异性。 异源DNA，视亲缘关系远近 也可发生不同频率整合。 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 (三)、转化作图 莱德伯格等用枯草杆菌进行转化和重组试验： 　　 DNA 片段与受体染色体重组，紧密连锁的两个基因有较多的机会同时整合到受体染色体中。 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 　 单交换时，染色体开环易降解，故不存在单交换类型； 只有双交换和偶数的多交换才有效。 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 五、E.coli 的转导 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 莱德伯格与津德（1951）： 2. 转导的发现 两个沙门氏菌的营养缺陷型进行杂交 (一)、转导的发现 　1. 概念：指以噬菌体为媒介进行的细菌遗传物质重组。 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 产生上述结果的原因: 　 ③. 是否属于回复突变? 　　 高频率出现不可能是回复突变。 　 ①. 是否属于接合? 　　 戴维斯U型管试验(防止细胞直接接触) è 也获得野生 型重组体，排除由于接合或性导而产生基因重组可能性。 　 ②. 是否属于转化? 　　 结果表现为不受DNA酶的影响，排除了由于DNA片 断通过滤片经转化实现基因重组可能性。 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 唯一可能的结论是：这种重组通过一