细菌的遗传分析-1.pptVIP

F+×F－的后代为F+ Hfr×F－的后代为F－ 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 上节课主要内容回顾 非顺序四分子的遗传分析方法 RF= 1/2T + 3NPD 细胞的遗传分析 重要概念：接合、F因子、Hfr 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 (四)、中断杂交与染色体作图 中断杂交作图：基因距离的单位是min而不是cM。 　1956年，雅各布（Jacob F.）和沃尔曼（Wollman E.）： 　中断杂交试验：发现接合时遗传物质转移是直线进行。 ⑴．Hfr菌株与F－菌株混合培养。 　　Hfr菌株：strs a+ b+ c+ d+　　对链霉素敏感 　　F-菌株： strr a- b- c- d-　　 抗链霉素 ⑵．不同时间取样 搅拌器中断杂交　　　稀释 含链 　　含链霉素完全培养基　　　杀死Hfr细菌　　　抗str细菌 　　菌落　　　影印培养法：鉴定a+b+c+d+各基因转移时间。 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 ⑶．实例：供体：Hfr：strs thr＋ leu＋ azir tonr lac＋ gal＋ 受体：F－ ：strr thr－ leu－ azis tons lac－ gal－ thr+(苏氨酸) 、 leu+(亮氨酸) 、 azir(抗叠氮化物) 、 tonr(抗T1噬菌体) 、 lac+(乳糖) 、 gal+(半乳糖) 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 ①．8分钟时：thr+进入F -细胞； ②．8.5分钟时：leu+进入F -细胞；③． 9分钟时：出现叠氮化物抗性 的菌落； ④． 11分钟时：出现抗噬菌体T1 的F-细菌； ⑤．18分钟时：出现乳糖发酵基因； ⑥．25分钟时：出现半乳糖发酵基因； 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 标记基因 转入的时间（分钟） 频率 thr+ 8 100(经选择的) leu+ 8.5 100(经选择的) azis 9 90 tons 11 70 lac+ 18 40 gal+ 25 25 中断杂交作图结果 以基因出现的时间为标准 è 作出E. coli的遗传连锁图 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 取样时间（分） 各非选择标记的重组频率(%) thr+ leu+ azis tons lac+ gal+ 5 0 0 0 0 0 10 100 12 3 0 0 15 100 70 31 0 0 20 100 88 71 12 20 40 100 90 75 38 30 Hfr × F-中断杂交中不同时间非选择标记标记的重组率 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 ①.各基因的重组频率随着时间的推移而增加，但在一定程度后便不再增加； ②.各基因进入受体的时间不同，重组频率达到最高的时间也不同。 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 Hfr类型 原点 基因转移顺序 HfrH O thr　　　　　　　 pro lac pur gal his gly thi Hfr1　　　　　　　　　 O thr thi　 gly his　 gal　 pur lac pro Hfr2　　　　　　　　　　 O pro thr thi gly his gal pur　 lac Hfr3　　　　　　　　　　　　 O pur lac pro thr thi gly his gal HfrAB312　　　　　　　　　　　 O thi thr pro lac gur gal　 his gly ⑷．用一种大肠杆菌的不同Hfr菌株进行中断杂交实验，作出连 锁图，其基因向F-细胞转移的起始基因不同，方向不同，但顺 序相同。 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 Hfr类型 原点 基因转移顺序 HfrH O thr　　　　　　　 pro lac pur gal his gly thi Hfr1　　　　　　　　　 O thr thi　 gly his　 gal　 pur lac pro Hfr2　　　　　　　　　　 O pro thr thi gly his gal pur　 lac Hfr3　　　　　　　　　　　　 O pur lac pro thr thi gly his gal HfrAB312　　　　　　　　　　　 O thi thr pro lac gur gal　 his gly 哈工大-遗传学 第四章 细菌的遗传分析 Hfr：lac+ade+(lac在5’) (五)、重组作图 两基因转移时间间距＜2分钟时，中断杂交法的