分子生物学复习题答案—终极背诵版.docxVIP

分子生物学终极背诵版1. 反义核酸技术：反义核酸是指能与特定mRNA精确互补、特异阻断其翻译的RNA或DNA分子。利用反义核酸特异地封闭某些基因表达，使之低表达或不表达，这种技术即为反义核酸技术。它包括反义RNA、反义DNA和核酶(ribozymes)三大技术。2. 分子克隆：在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因，用体外重组方法将它们插入克隆载体，形成重组克隆载体，通过转化与转导的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩增。3. 基因工程：所谓基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。4. 感染：是利用噬菌体或病毒将外源DNA导入宿主细胞的方法。5. 转化：是指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主菌，并使其获得新的表型的过程。6. 载体：能将外源DNA或基因片段携带入宿主细胞内的一个具有自主复制能力的DNA分子。7. 转导：由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。它是细菌之间传递遗传物质的方式之一。其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。8. 基因敲除：是指通过DNA同源重组定向的将外源基因插入宿主细胞染色体DNA，从而使特定基因在细胞内或生物活体内失活的过程。9.断裂基因：又称不连续基因，是指大多数真核生物基因的显著特征是在编码区内含有非编码的插入序列，不同于原核生物的结构基因是连续的。10.假基因：是指与某些有功能的基因结构相似，但不能表达基因产物的基因。11.逆转录、RT-PCR:逆转录聚合酶链反应，先将RNA通过逆转录酶的作用合成与之互补的DNA链，再以该链作为模板通过常规PCR技术进行DNA扩增。12.SD序列：原核生物起始密码子AUG上游7~12个核苷酸处有一称为SD序列的保守区，因为该序列与16S rRNA 3’端反向互补，所以被认为在核糖体与mRNA的结合过程中起作用。13.细胞凋亡：生物体内细胞在特定的內源和外源信号的诱导下，其死亡途径被激活，并在有关基因的调控下发生程序性死亡的过程。14.分子杂交：不同来源或不同种类生物分子间相互特异识别而发生结合。如核酸之间，蛋白质分子之间的特异性结合。15.癌基因与抑癌基因癌基因是生物体内或细胞内一类正常基因，表达产物控制细胞的生长和分化。只有当它的结构改变或表达异常时，才可以引起细胞癌变。抑癌基因是一类抑制细胞过度生长、增殖从而遏制肿瘤形成的基因。问答题：试述复制、转录、翻译的异同点DNA复制RNA转录蛋白质翻译原料4种dNTP4种NTP20种氨基酸模板DNA双链DNA模板mRNA酶或蛋白质因子DNA聚合酶解链解螺旋酶类引物酶、连接酶RNA聚合酶ρ因子氨基酰tRNA合成酶转肽酶、释放因子起始因子、延长因子引物需要不需要不需要碱基配对A-T,G-CA-U,A-T,G-CA-U,G-C,I-A、C、U合成方向5’-3’端5’-3’端N-C端遗传信息流向DNA→DNADNA→RNARNA→蛋白质产物子代双链DNAmRNA,tRNA,rRNA蛋白质多肽链产物加工修饰不需要需要需要供能物质ATP—ATP,GTP无机离子Mg2+Mg2+,Mn2+Mg2+,K+试述PCR的原理与步骤及可以优化的步奏在哪里，PCR引物设计一般遵循的原则是什么？原理：用于扩增两个预设位点间的DNA片段。以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板5′末端和3′末端互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，重复这一过程，即可使目的DNA片段得到扩增。步骤：扩增的特异性取决于引物与模板DNA的特异结合，基本反应步骤分三步：1. 变性 (Denaturation)：加热使模板DNA双链间的氢键断裂而形成两条单链。94℃ 30″2. 退火 (复性) (Annealling):突然降温后模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合，也存在两条模板链之间的结合，但由于引物的高浓度，结构简单的特点，主要的结合发生在模板与引物之间。55 ℃ 30 ″3. 延伸 (Extension):将反应温度调节到酶的最适温度，在DNA聚合酶、4种 dNTPs 及镁离子等存在的条件下，以引物的 3′ 端开始，结合单核苷酸，形成与模板链互补的新DNA链。72 ℃ 1′。上述 3 步为一个循环，每经过一个循环，样本中的DNA量应该增加一倍，新形成的链又可成为新一轮循环的模板，经过25～40个循环后DNA可扩增106 ～ 109 倍。PCR反应条件优化：1、温度、循环参数：⑴ 变性温度和时间：保证模板DN