分子生物学考试题答案整理.docVIP

分子生物学复习题 1名解 启动子：(promoter)与基因表达启动相关的顺式作用元件，是结构基因的重要成分。它是一段位于转录起始位点5’端上游大约100-200bp以内的具有独立功能的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模版DAN准确地相结合并具有转录起始的特异性。 假基因：（pseudo gene）, 在多基因家族中，某些成员并不产生有功能的基因产物，这些基因成为假基因。 单核苷酸多态性（SNP）：是指基因组序列中的单核苷酸（A,T,C或G）改变时发生的DNA序列多态性。人类基因组平均每100-1000碱基就有一个SNP。个体之间单核苷酸的差异在群体中的频率1%。 原位杂交:(in situ hybridization,ISH)是用标记的核酸探针，经放射自显影或非放射检测体系，在组织、细胞及染色体水平上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段。通常分为RNA原位杂交和染色体原位杂交两大类。 Wstern blot: 免疫印迹法是SDS电泳的高分辨率与免疫反应的高度特异性相结合。待测样品经SDS电泳分离后，转移到固相介质如醋酸纤维膜上，然后用标记抗体揭示特异抗原的存在。此法广泛用于蛋白质样品分析研究。 基因knock out鼠：小鼠体内任何一个基因都可能通过基因打靶的方式对其进行灭活，也就是产生一般概念上的基因敲除小鼠。基因敲除小鼠可用来观察灭活基因对个体表型等方面产生哪些负面影响。 基因组：（genome）生物有机体的单倍体细胞中的所有DNA，包括核中的染色体DNA和线粒体、叶绿体等亚细胞器中的DNA. 转基因小鼠：将特定的目的基因从某一动物体分离出来，进行扩增和加工，再导入另一动物的早期胚胎细胞中，使其整合到宿主动物的染色体上，在动物的发育过程中表达，并通过生殖细胞传给后代。这种在基因组中稳定地整合外源基因的动物称转基因动物（transgenic animal）。转基因鼠的构建方法有显微注射法、胚胎干细胞移植法、反转录病毒感染法和精子载体导入法。 限制性内切酶（restriction endonuclease）：体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它可以将外来的DNA切断的酶，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶(简称限制酶)。 质粒DNA：质粒（Plasmid）是一种双链的共价闭环状的DNA分子它是染色体外能够稳定遗传的因子。质粒具有复制和控制机构，能够在细胞质中独立自主的进行自身复制，并使子代细胞保持它们恒定的拷贝数。 免疫组织化学：是利用特异性抗原抗体反应，观察和研究组织细胞特定抗原（或抗体）的定位和定量的技术。为了显示组织和细胞内抗原抗体反应，需要预先将某种标记物结合到抗体上，借标记物的荧光或酶的有色反应，在显微镜下进行定性、定位或定量观察。免疫组化染色法分为①免疫荧光法和②免疫酶法。 DNA芯片：同一时间对大量样品进行高通量分析的技术借助光刻技术及化学固相合成法,将DNA探针阵列分布于玻璃或硅基片上，与液相中待测组分进行杂交，通过检测荧光或其他标记物而分析反应结果。 蛋白质芯片：指固定于支持介质上的蛋白质构成的微阵列,又称蛋白质微阵列(Protein miogrorray).蛋白质芯片是一种高通量的蛋白功能分析技术，可用于蛋白质表达谱分析，研究蛋白质与蛋白质的相互作用，甚至DNA－蛋白质、RNA－蛋白质的相互作用，筛选药物作用的蛋白靶点等 HRM（high resolution melting）高分辨率熔解曲线 是基于核酸的物理性质， 通过饱和染料监控核酸的熔解曲线变化进行分析的一种技术。它是在常规PCR基础上增加一种饱和染料， 无需使用序列特异性探针。 Northern hybridization：原理：RNA经过变性琼脂糖凝胶电泳分离后，转移到硝酸纤维膜或尼龙膜上，经过杂交，分析mRNA的大小及含量。应用：半定量分析mRNA的含量；确定mRNA分子的大小。 实时定量PCR (real-time quantitative PCR)是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量 通用转录因子RNA聚合酶介导基因转录时所必需的一类辅助蛋白质，帮助聚合酶与启动子结合并起始转录。与作用于特定基因的调节蛋白不同，对所有基因都是必需的。 顺式作用元件指顺式作用元件利用结构基因组学研究所得的各种信息在基因组水平上研究编码序列及非编码序列生物学功能的学科于20世纪80年代提出，由美、英、日、中、德、法等国参加并于2001年完成的针对人体23对染色体全部DNA的碱基对序列进行排序，对大约25 000基因进行染色体定位，构建