HBcAg生物学特性研究进展.docVIP

HBcAg生物学特性研究进展 ? 摘要 HBcAg存在于Dane颗粒的核心，是HBV的结构蛋白即病毒核壳蛋白，具有重要的生物学特性和临床病理意义. HBcAg由HBV基因组的C开放读码区(ORF)编码，具有高度免疫原性，对HBcAg的免疫应答在病毒清除中有重要作用. 血清HBcAg阳性可提供肝内HBV合成的信息，是病毒存在的直接标志. HBcAg感染的肝细胞是细胞免疫效应攻击的靶细胞，肝细胞溶解后HBcAg可直接释放入血，故能直接反映肝细胞损害和病情进展的程度. 检测肝组织HBcAg有助于确定乙型肝炎病原学诊断和评估肝细胞坏死炎性活动的程度及病变发展的趋向，推测慢性乙型肝炎的预后. 血清和肝组织HBcAg检测具有多种实用价值，值得推荐. ? 引言 乙型肝炎病毒(HBV)是嗜肝DNA病毒，完整的HBV颗粒又称Dane颗粒，球形，直径约 42 um. HBV核心抗原(Hepatitis B Core Antigen，HBcAg)存在于Dane颗粒的核心，是HBV的结构蛋白即病毒核壳蛋白，主要存在于受感染的肝细胞核内，他反映血清中Dane颗粒的存在及肝内HBV的复制. 存在于乙型肝炎患者血液和肝组织内的HBcAg具有重要的生物学特性和临床病理意义. ? 1?? 生物学特性 1.1 一般特性 ?HBcAg由HBV基因组的C开放读码区(ORF)编码，从第二个ATG(1 901 nt)起始翻译(终止密码子在2 458 nt). HBcAg有保守的三维结构，可因血清型不同而有183-185个氨基酸残基(aa)，相对分子质量Mr 21 000，180个HBcAg形成27 nm的正20面体以构成核心颗粒. HBV核心部分含有环状双股DNA、DNA聚合酶、HBcAg和e抗原(HBeAg)，是病毒复制的主体. HBcAg包装HBV DNA，在病毒成熟过程中起重要作用. HBcAg已被证明[1]含有HBV特异性DNA聚合酶，是HBV复制的标志. ?? HBcAg可在受染的肝细胞核中查到，但他主要在胞质中产生，由胞核定位序列(nuclear localization sequences，NLS)[2]介导HBcAg进入细胞核中. 胞核定位序列位于 HBcAg的羧基末端区(C端区)第145-156位和第172-183位的氨基酸序列[3]，具有与细胞核特异性结合，并将与之相连的蛋白或DNA转运到细胞核中的功能. 1.2 免疫反应? HBcAg具有高度免疫原性，在T细胞和B细胞水平上，HBcAg的抗原性较HBeAg强100倍[4]，几乎所有HBV感染者都产生抗-HBc，同时有T细胞免疫应答. 对HBcAg的免疫应答在病毒清除中可能有重要作用[5-11]. 这对HBcAg DNA[12]疫苗研究有重要的指导意义. ?? Th细胞根据其的分泌细胞因子不同可分为Thl和Th2亚群. Thl细胞主要产生白介素-2(IL-2)，干扰素g(IFNg)和肿瘤坏死因子a(TNFa)等促进细胞免疫反应; Th2细胞主要产生白介素-6(IL-6)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)等促进体液免疫反应. Thl和Th2细胞通过分泌的细胞因子相互下调对方的生长分化，刺激自身的增生. 机体的Thl型免疫反应可促进病原体的清除，而Th2型免疫反应则可加重机体的病理损害. 在HBcAg诱导下[7, 13]，外周血单个核细胞(PBMC)产生Thl类细胞因子量明显增高; 在HBeAg诱导下，Th2类细胞因子量明显增高. 慢性HBV感染进行免疫调节治疗的一个目标就是使HBeAg特异性T细胞由Th2细胞主导型转化为Thl细胞型，HBcAg有望打破 HBeAg诱导的免疫耐受状态而增强Thl细胞优势表达达到治疗的目的. 慢性乙型肝炎患者和HBV慢性携带者体内针对HBV的特异性CTL应答明显低下，纠正这种CTL低反应状态，对于机体有效地清除HBV至关重要[14]. ?? DNA疫苗(基因疫苗)是近几年免疫学和分子生物学研究的新兴领域，他作为一种全新的高效免疫方法，已在许多难治性感染性疾病、自身免疫性疾病、过敏性疾病和肿瘤性疾病的预防及治疗领域显示出较好的应用前景. DNA疫苗可刺激机体特异性CTL功能的特性给HBV慢性持续感染的治疗带来新的希望 ?? 采用治疗性疫苗打破宿主对HBV的免疫耐受状态来治疗慢性乙型肝炎和慢性乙型肝炎病毒携带者是一新的有效途径[15]. HBV核心抗原区AA1-AA151段含有多个不连续的抗原表位，对刺激机体产生特异性的体液免疫和细胞免疫均具有重要作用[16]. Kuhober和Geissler et al [17-18]作了HBcAg DNA疫苗肌内注射法免疫小鼠的初步观察. 该DNA疫苗具有良好的细胞免疫原性，确可刺激宿主产生较强的CTL反应. 这一结果为