女贞子药材中的含量测定.doc

高效液相法测定女贞子药材中齐墩果酸的含量 摘要： 目的 建立女贞子药材中齐墩果酸含量的测定方法。 方法 采用高效液相法，色谱条件：C18柱，流动相为乙腈-0.4%磷酸（70：30），检测波长为210nm，流速为1ml/min 。结果在0.21～30.02mg/ml 范围内，齐墩果酸的进样量与峰面积呈良好的线性关系，方法学考察各项指标符合要求。结论 超声处理方法结果准确、操作方便简单，可作为女贞子药材中的的齐墩果酸含量测定方法。 关键词：女贞子；齐墩果酸；HPLC 女贞子为木犀科植物女贞ligustrum lucidum Ait的干燥成熟的果实，具有滋肝肾、明目乌发，用于眩晕耳鸣、腰膝酸软、须发早白、目暗不明。女贞子主要含有女贞苷（nuzhenide）））））） 图1 齐墩果酸对照品色谱图 图2 供试品图谱 图2 供试样品色谱图 2.4 方法学考察 2.4.1 线性关系考察 分别精密吸取齐墩果酸对照品溶液 1、3、5、8、15ul, 依次注入液相色谱仪，测定峰面积，以对照品峰面积为纵坐标，以进样量为横坐 标进行线性回归，得回归方程Y=0.0019X+0.0006,r=1。结果表明，在0.21～ 30.02mg/ml 范围内，齐墩果酸的进样量与峰面积呈良好的线性关系。 2.4.2 稳定性考察 供试品溶液在室温下保存，分别于0、5、9、15、24h测 定齐墩果酸峰面积，结果RSD为2.10%。 2.4.3 精密度试验 取对照品溶液注入液相色谱仪，连续5次进样，测得峰面 积，结果RSD为1.08%。 2.4.4 重复性试验 取女贞子药材粉，混匀，分别称取6份，按超声提取方法 （2）法制成供试品溶液，另取对照品溶液，分别注入液相色谱仪进行测定，计 算，结果RSD为2.21%。 2.4.5 加样回收率试验 取已知含量药材粉，混匀，分别称取9份，每份约 1.00g，精密称定，分为3组，分别准确加入不同量的齐墩果酸对照品，按超声 提取方法（2）法进行制备，用无水乙醇定容至50ml，测定，计算结果。结果齐 墩果酸的平均回收率为97.1%，RSD为2.1% 。见表一： 表1 回收率测定结果 序号 取样量 (g) 加入量 (mg) 测得量 (mg) 回收率（%） 平均回收率 （%） RSD（%） 1 1.051 1.050 15.64 94.3 97.1 2.1 2 1.089 1.003 15.66 95.7 3 1.101 1.046 15.68 98.5 4 1.081 1.573 16.19 97.9 5 1.204 1.501 16.07 94.6 6 1.075 1.558 16.22 100.8 7 1.132 2.005 16.61 97.8 8 1.267 2.077 16.68 97.7 9 1.095 2.013 16.59 96.4 2.5 10批女贞子药材齐墩果酸含量测定 ， 分别称取上述10批样品，按照含量测定法测定，其含量分别为14.78、16.97、15.65、15.28、12.95、14.65、13.48、15.77、14.96、18.93mg/g。 讨论 3.1 从实验结果显示:本实验所采用的三种最常用提取方法，结果以超声提取 （2）法、索氏提取含量最高，平均达到 15.04 mg/g、 15.00 mg/g，回流提取 结果居中为13.42 mg/g。索氏提取、分次超声提取和回流提取这三种方法因时 间过长或步骤繁琐，在操作过程中有效成分损失，影响结果的准确度。索氏提取 与超声（2）法测得结果基本一致，由于超声提取简单、快速，故本实验采用超 声（2）法。 3.2 在实验的过程中，我们取超声（2）法所剩的残渣，加无水乙醇30ml，再 继续超声30min，结果测得齐墩果酸含量均在0.003 mg/g左右，说明女贞子药 材齐墩果酸的含量能够较好提取完全，而且操作简单，方便，快捷。 3.3 在实验过程中，采用三氯甲仿对样品进行索氏提取，结果含量偏低，可能 是有少量不溶于甲醇的非极性物质，本实验未深入探索研究；三氯甲仿为有毒试剂，故采用乙醇作为溶剂。 参 考