04第四章免疫球蛋白.docVIP

第四章 免疫球蛋白 目的要求： 1． 掌握抗体、免疫球蛋白和单克隆抗体概念 2． 掌握免疫球蛋白的基本结构和抗体特异性的结构基础 3． 掌握免疫球蛋白的功能 4． 熟悉免疫球蛋白水解片段的结构及功能 5． 熟悉五种免疫球蛋白的特性 6． 了解免疫球蛋白的的辅助成分和异质性 教学时数：2学时 概 述 抗体(antibody, Ab)：B细胞在抗原刺激下分化为浆细胞，产生能与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白，称为抗体。 抗体活性存在血清蛋白α-γ区，主要存在γ区。 免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig)：将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白。 Ig根据存在的部位可分为两种：分泌型(sIg)，具有抗体各种功能；膜型(mIg)，构成B细胞膜上的抗原受体(BCR)。 第一节　　免疫球蛋白的结构 一、免疫球蛋白的基本结构（图示）450-550aa，据恒定区aa不同分：IgG、IgM、IgA、IgD、IgE五类或同种型(isotype)，对应的重链为：ｒ μ α δ ε。 ⑵轻链：214aa，恒定区aa不同分：κ、λ两型 ⑶天然Ig单体结构中，两条重链同类，两条轻链同型。 2、可变区与恒定区 ⑴可变区（variable region，V区）：位于Ig分子的N端、轻链1/2和重链1/4或1/5处；其氨基酸序列随Ig针对的抗原特异性变化而变化，是抗体与抗原特异性结合的部位。V区可进一步分为超变区（或者互补决定区）和骨架区。 * 超变区（hypervariable region, HVR）：在VL和VH中，某些特定位置的氨基酸残基的排列顺序高度可变，此为HVR。轻、重链各有3个HVR。超变区乃抗体与抗原表位（AD）特异性（互补）结合的位置，又称为互补决定区（complementarity-determining region, CDR）。 * 骨架区（framework region, FR）：V区中非HVR部位的氨基酸组成和排列相对保守，此为FR。VH和VL各有4个FR。 ? 恒定区（constant region,C区）：位于Ig 分子的C端、轻链1/2和重链3/4或4/5处。其氨基酸的组成或排列顺序不随Ig针对的抗原特异性的改变而改变。是Ig介导多种生物学功能的部位。 ⑷独特型 3、其它结构与有关功能和相关Ig共同学习 ⑴铰链区：CH1-CH2间 ⑵J链：浆细胞合成 ⑶分泌片：粘膜上皮细胞合成 二、Ig的功能区：Ig各条肽链通过链内二硫键连接并折叠成若干球形结构域，每个结构域约由110个氨基酸组成，提供一个活性部位或行使一种或多种生理功能，称为Ig的功能区（结构域）。其二级结构是两个反向平行的β片层，两个片层中心的两个半胱氨酸残基由一个链内二硫键垂直连接，形成一个“β桶状”或“β三明治”结构。免疫球蛋白超家族 1、VH/VL：抗原结合部位。由CDR构成凹槽状空间结构，供抗原决定基特异性结合。 2、CH1/CL：具有部分同种异型(allotype)的遗传标志。 3、铰链区：位于CH1和CH2之间。易变构，利于CDR与抗原决定基结合。与抗原决定基结合后使Ig由“T”→“Y”，暴露CH2上的补体结合点。 4、CH2：具有IgG的补体C1q结合点；IgG通过胎盘 5、CH3,CH4：具有IgM的补体C1q结合点；IgG可与不同细胞结合，产生不同的免疫效应；IgE的CH2,CH3与肥大细胞、嗜碱性粒细胞结合，介导Ⅰ型变态反应。 三、Ig的水解片断：以IgG为例 1、木瓜蛋白酶(papain)：铰链区二硫键近N端 ⑴2个Fab：与Ag结合(单价) ⑵1个Fc：结合补体，固定细胞，通过胎盘。 2、胃蛋白酶(pepsin)：铰链区二硫键近C端 ⑴1个F(ab’)2：与Ag结合(双价)。 ⑵pFc’：无活性。 第二节　　免疫球蛋白的异质性 一、免疫球蛋白的类型 1、类(class)：依据C区抗原表位不同，重链可分γ、α、μ、δ、ε五种，对应的Ig分五类：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。 2、亚类(subclass)：同一类Ig依据重链的抗原性及二硫键数目和位置的不同，可分亚类： IgG1～4,IgA1～2。 3、型(type)：依据轻链C区抗原表位不同，轻链可分两型――λ和κ。 4、亚型(subtype)：依据轻链C区N端氨基酸排列的差异，可分亚型。 二、外源因素所致的异质性——免疫球蛋白的多样性 自然界抗原数目巨大且结构复杂，含多种抗原表位，每一表位均可诱导产生一种特异性抗体，故抗体总数亦巨大。包含针对各种抗原不同表位的特异性抗体和同一表位的不同类型的抗体。抗原 的多样性导致抗体的异质性。抗体的异质性反映出机体对抗原精细结构的识别和应答。 三、内源因素所致的异质性