亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性及血浆半胱氨酸水平与儿童支气管哮喘的关系研究.pdfVIP

广西医学 2013年 11月第35卷第 11期 1499 亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性及血浆半胱氨酸 水平与儿童支气管哮喘的关系研究 孙淑媛 杨丽萍 路旭红 卢 燕。 刘桂玲。 韩彩丽。 (1河北省石家庄市第五医院儿科，石家庄市 050021，E—mail：746559001@qq．com； 2河北省石家庄市第六医院儿科；3河北医科大学) 【摘要】 目的 探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFRC677T)基因多态性及血浆半胱氨酸(Hey)水平与 儿童支气管哮喘的关系。方法 采用PCR技术和限制性内切酶片段长度多态性分析方法，检测支气管哮喘患 儿、健康儿童各90例的MTHFRC677T基因的多态性，采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法测定血浆Hcy水 平。结果 儿童支气管哮喘患者突变基因频率高于对照组(P0．01)；CC、CT、TY3种基因型之间差异有统 计学意义(P0．01)；CT(突变杂合子)与CC(未突变纯合子)二基因型频率分布两组间差异无统计学意义 (P0．05)。过敏性和非过敏性哮喘患者间的3种基因型和等位基因比较，差异无统计学意义(P0．05)。哮 喘组的血浆Hcy水平高于对照组(P0．01)。结论 MTHFRC667T基因突变及 Hcy水平与儿童支气管哮喘 的发生有关，MTHFRC667T其可能通过升高血浆Hcy水平来影响儿童支气管哮喘发生。 【关键词】 支气管哮喘；亚甲基四氢叶酸还原酶；基因多态性；半胱氨酸；儿童 【中图分类号】 R562．25 【文献标识码】 A 【文章编号】2013)11．1499．04 DoI：10．11675／j．issn．0253-4304．2013．11．23 支气管哮喘是临床上多发、常见的疾病之一，目 敏史。对照组：同期随机选取我院门诊体检的健康儿 前，支气管哮喘的患病率逐年上升，已经严重影响人 童90例作为对照组，其中男46例，女44例，年龄2～ 们的身心健康。支气管哮喘的发病机制尚不明了，但 11(5．5-41．9)岁。本研究经患者家属知情同意， 与遗传、免疫、神经及环境等因素存在一定关系，是一 并经本院伦理委员会同意并批准。两组性别、年龄 种多基因遗传病，由不同的基因和不同外界因素共同 及一般健康情况等资料 比较，差异均无统计学意义 造成支气管哮喘的多样性、多变性…。既往研究发 (P0．05)，具有可比性。 现亚 甲基四氢叶酸还原酶(MTHFRC677T)基因突变 1．2 试剂及仪器 (1)试剂：dNTP、Hinfl内切酶、 会导致酶的热稳定性下降，可引起高半胱氨酸 (Hcy) TaqDNA聚合酶及微量DNA提取试剂盒为美国am． 血症，提示 了MTHFR基因多态性与哮喘关系 J， resco公司产品；溴化乙淀、琼脂糖、DNAMarker均为 但资料相对零散缺乏系统性分析。笔者研究 了 上海一基生物科技有限公司产品，引物由上海金穗生 MTHFRC677T基因多态性及血浆Hcy水平与儿童支 物科技有限公司合成；酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 气管哮喘的关系，现报告如下。 试剂盒由上海研卉生物科技有限公司生产。(2)仪 器：GelDoc—ItTSImagingSystem型凝胶成像系统 (上 1 资料与方法 海市金鹏分析仪器有限公司)、TC一3000PCR扩增仪 1．1 临床资料 选择20o8年 5月至2012年8月在 (美国Techne公司生产)，DYCP-31A型水平琼脂糖 我院门诊及住院治疗的儿童支气管哮喘患者 90例， 电泳槽和DYY-III型稳压稳流电泳仪是北京六一仪 其中男49例，女41例，年龄 2—10(5．34-1．5)岁。 器厂生产。 所有患者均处于临床缓解期或急性发作期，诊断符合 1．3