人增生性瘢痕成纤维细胞的改良培养和鉴定.pdfVIP

实用医学杂志 20l1年第 27卷第 24期 人增生性瘢痕成纤维细胞的改 良培养和鉴定 林尊文 徐少宏 游敏 刘德伍 钟世镇 摘要 目的：探讨并建立一种简便易行、培养周期短的成纤维细胞改良培养方法。方法：采用组织块贴 壁结合胰蛋白酶消化法体外分离培养人增生性瘢痕成纤维细胞。倒置相差显微镜下观察培养的成纤维细胞 形态，进行细胞鉴定，作生长曲线观察细胞增殖能力。结果：采用组织块贴壁结合胰蛋白酶消化法体外分离 人增生性瘢痕成纤维细胞，细胞培养周期短。分离培养的成纤维细胞波形蛋 白呈阳性表达。传代培养的成纤 维细胞增殖能力强。结论：采用组织块贴壁结合胰蛋白酶消化法体外分离培养法可以较快、较好地获得稳定 培养的增生性瘢痕成纤维细胞。为其形成机制及防治研究提供实验基础。 关键词 成纤维细胞； 增生性瘢痕； 体外培养 Refined cultureandidentification ofhumanhypertrophicscarfibroblasts L／N Zun—wen ， XU Shoo—hong， YOUMin， LIUDe—WU，ZHONGShi-zhen． DepartmentofHumanAn~omy， SouthernMedical e ， Gunagzhou510515，China Correspondingauthor：LIUDe-WU E—maif：dewuliu@12~com A【bstract】 0bjective Toinvestigateaneasyandshortcyclemethodofculturinghypertrophicscar fibroblastsinvitro．M ethods Isolationandcultureofhypertrophicscarfibroblastswereadministeredbythemethod which combined tissueexplantsadherentand enzyme digestion． Themorphologicalchangesoffibroblastswere observedunderinvertedmicroscope， thenthefibroblastswereidentifiedwith immunocytochemistry， andthe proliferationassaywasperformed withgrowthcurve． Results Theculturecycleofthemethodwhichcombined tissueexplantsadherentand enzyme digestionwasshort． The expression ofvimentin protein waspositive in fibroblastscultured． The subcultured fibroblastspossessedastrongreproductiveability． Conclusion Stable fibroblastswerecuhuredmore easily and quicklywith themehtod combining thetissueexplantsadherentand trypsindigestion． K【eywords】 Fibroblast； Hypertrophicscar； Cultureinvitro 增生性瘢痕是临床常见的以成纤维细胞过渡 司)、0．25％胰蛋白酶 +EDTA (美国Gibco公司)、 增殖和细胞外基质无序沉积为特征纤维组织过度 鼠抗人波形蛋白多克隆抗体 (武汉博士德)、通用 增生性疾病 ]。目前其发病机制尚未阐明，也缺乏 型SP检测试剂盒 (北京中杉金桥公司) 有效的防治方法。鉴于成纤维细胞的过度增殖在 1．2 标本来源 取烧伤患者增生性瘢痕手术切除 其发展过程中起着关键的作用 [5-6]，对增生性瘢痕 后标本 ，所有患者均无全身器质性病变。