人子宫内膜腺上皮和基质细胞的分离与培养.pdfVIP

实用医学杂志 2011年第 27卷第 12期 人子宫 内膜腺上皮和基质细胞的分离与培养 韩冬 王 自能 摘要 目的：探索一种简便人子宫内膜腺上皮细胞和基质细胞的分离培养方法。方法：通过筛网法和差 迷离心法．分离培养 5例子宫内膜腺上皮和基质细胞，利用免疫细胞化学染色及其激光共聚焦显微镜鉴定分 离的细胞并进行 图像分析。结果：用差速离心·法分离子宫内膜腺上皮细胞中CK一19阳性表达积分为4．16± 0．22，子宫内膜基质细胞中Vimentin阳性表达积分为4．24±0．22，与筛网法相比较差异有统计学意义(P O．05)。结论 ：通过改良差速离心法使腺上皮和基质细胞分离步骤简化，是一种较理想子宫内膜细胞分离培养 方 法 。 关键词 子宫内膜；腺上皮细胞；基质细胞； 细胞培养 Isolation and cultivation ofhuman endometrialglandularepithelialcellsand stromalcells ／n vitro HAN Dong，WANGZi—nerig．DepartmentofObstetricsandGynecology，theFirstAffiliatedHospitalof no,nUniversity， Guangzhou510632，China A【bstract】 0bjective Toexploreaconvenientmethodofseparatingandculturinghumanendometrial glandularepithelialcellsandstromalcellsinvitro． M ethods Humanendometrialglandularepithelialcellsand stromalcellsfrom 5caseswereseparatedbyfiltratedmethodandgradientcentrifugation． Theseparatecellswere identifiedbyimmunocytochemicalstainingandlaserscanningconfocalmicroscopy．Results Theexpressionscoreof CK一19inendometrialglandularepithelialcellswas4．16 ±0．22． andthatofVimentininstromalcellswas4．24 ± O．22incellsseparatedbygradientcentrifugation． bothweresignificantlydifferentfrom thoseseparatedbyfiltrated method fP0．05)．Conclusion Asimpleandconvenientmethodtoseparateandculturehumanendometrial glandularepithelialcellsandstrornalcellscanbeobtainedbythemodifiedgradientcentrifugation． K【eywords】 Endometrium； Glandularepithelialcell；Stromalcell； Cellculture 随着生殖生理及妇科病理研究的不断发展，对 (Vimentin)(Invitrogen公司)，SP试剂盒及 DAB显 人子宫内膜细胞进行体外培养，可为研究内膜腺上 色试剂盒均购 自北京世纪康为公司。荧光标记二抗 皮细胞和基质细胞生长、分化 、激素影响机制提供 四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC—anti—rabbit)及 DAPI 一 种体外试验模型，但 目前分离与培养子宫内膜腺 均购 自碧云天生物技术研究所。荧光标记二抗异硫 上皮细胞和基质细胞的方法及成功率相差较大。本