载基因 PGenesil-TGF-β1壳聚糖纳米粒的制备和性能研究.pdfVIP

生 物 医 学 工 程 研 究 　　　　 ２０１３，３２（４）：２３１～２３４ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈ 载 基 因 ＰＧｅｎｅｓｉｌＴＧＦ １壳 聚 糖 β 纳 米 粒 的 制 备 和 性 能 研 究  １ ２ １ １ 张千 ，胡迎春 ，都泓莲 ，邓存 良 △ （１．泸州医学院附属医院感染病科，泸州 ６４６０００；２．泸 州医学院附属医院急诊科，泸州 ６４６０００） 摘要 ：制备负载重组质粒 ＰＧｅｎｅｓｉｌＴＧＦβ１的壳聚糖纳米粒，并研究其结构特征和性能特 点 。采用复凝 聚法制备壳聚糖ＰＧｅｎｅｓｉｌＴＧＦ １（报告基因）纳米微粒体 ，通过投射 电镜测定其形态、粒径；采用全光谱分 β 光光度计测定该复合物 的包封率 ；凝胶 电泳 阻滞实验分析纳米粒载体与质粒 的结合能力；ＤＮａｓｅＩ消化实验 观察壳聚糖纳米粒保护质粒抵抗核酸酶的能力 。制备 的壳聚糖 － ＰＧｅｎｅｓｉｌ－ＴＧＦ－β１纳米粒均呈球形，微 粒直径在 １００～２００ｎｍ之间，平均约 （１２７．３７±１９．７５）ｎｍ；其包封率为 （９４．３８±０．４５）％；凝胶 电泳 阻滞实验 结果表明壳聚糖纳米粒能通过静 电作用有效结合质粒，将其包裹在 内；ＤＮａｓｅＩ消化实验显示壳聚糖纳米粒 能有效地保护质粒免受核酸酶的降解 。用复凝聚法成功制得壳聚糖 － ＰＧｅｎｅｓｉｌ－ＴＧＦ－ １纳米粒，为后续 β 研究基因药物奠定 了实验基础。 关键词：壳聚糖；质粒；纳米技术；ＴＧＦ－ １；ＲＮＡ干扰；基 因重组 β 中图分类号：Ｒ３１８；Ｒ５１２．６　　文献标识码 ：Ａ　　 文章编号 ：１６７２６２７８ （２０１３）０４０２３１０４ ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＳｔｕｄｙｏｆ ＣｈｉｔｏｓａｎＮａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓＣａｒｒｙｉｎｇＴＧＦ １ β １ ２ １ １ ＺＨＡＮＧ ｑｉａｎ，ＨＵＹｉｎｇｃｈｕｎ，ＤＵＨｏｎｇｌｉａｎ，ＤＥＮＧＣｕｎｌｉａｎｇ （１．ＩｎｆｅｃｔｉｏｎＤｅｐａｒｍｔｅｎｔｏｆＬｕｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｌｕｚｈｏｕ６４６０００，Ｃｈｉｎａ； ２．ＥｍｅｒｇｅｎｃｙＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＬｕＺｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｌｕｚｈｏｕ６４６０００） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｐｒｅｐａｒｅｃｈｉｔｏｓａｎｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｃａｒｒｙｉｎｇｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｐｌａｓｍｉｄａｎｄｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｉｒｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ．Ｔｈｅｃｈｉｔｏｓａｎ－ＰＧｅｎ ｅｓｉｌ－ＴＧＦ－β１（ｒｅｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅ）ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄｂｙａｃｏｍｐｌｅｘｃｏａｃｅｒｖａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓ．Ｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙａｎｄｐａｒｔｉｃｌｅｄｉａｍｅｔｅｒ ｏｆｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｕｎｄｅｒｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ； ｔｈｅｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｎｇｒａｔｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍ