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参麦注射液对大鼠缺血再灌注心肌结构的影响.doc
参麦注射液对大鼠缺血再灌注心肌结构的影响
【关键词】 参麦注射液;大鼠;心肌缺血;再灌注损伤
【ABSTRACT】 Objective:To investigate the effects of Shenmai injection(SMI) on the structure of acute myocardial ischemiareperfusion injury(MIRI) in rats.Methods:24 rats ly into 3 groups(n=8):shamoperated group,myocardial ischemiareperfusion(MIR) model group and SMI group.The myocardium icroscope.Results:pared odel group,the destruction of myocardial cells and organelles ai injection can protect the myocardium on myocardial ischemiareperfusion injury in rats.
【KEY yocardial Ischemia,Reperfusion Injury
目前,治疗急性心肌梗死(AMI)时常运用经皮冠脉腔内成形术、冠脉搭桥术和溶栓术等使缺血的心肌组织在短时间内恢复血供,可改善心肌代谢,减轻缺血损害。但某些情况下反而导致进一步组织结构破坏和功能障碍,即出现心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemiareperfusion injury,MIRI)。再灌注后可出现严重的心律失常和心功能不全,甚至导致死亡。因此,如何有效地减轻MIRI成为近年来的研究热点。很多中药从不同方面对MIRI具有保护作用[1],其中,参麦注射液(Shenmai injection,SMI)具有益气固脱、养阴生津、生脉之功效,临床上已将其用于防治MIRI,收到良好的疗效[2,3]。我们主要从心肌结构方面探讨参麦注射液对MIRI的保护作用。
1 资料与方法
1.1 一般资料
1.1.1 药品和试剂
参麦注射液(神威药业有限公司);氨基甲酸乙酯(北京化学试剂公司)。
1.1.2 实验仪器
DHX150型动物呼吸机(成都仪器厂);OLYMPUS CX31型光学显微镜(日本);JEM100CⅫ型透射电镜(日本 电子 公司)。
1.2 实验动物及分组
健康IR) model group)和参麦注射液治疗组(Shenmai injection (SMI) group),每组8只。
1.3 实验方法
参照 文献 [4]的方法,稍加改良。用20%氨基甲酸乙酯腹腔注射麻醉(5mL/kg)大鼠,成功后仰卧固定于鼠板,颈部手术分离气管,行气管插管,连接动物呼吸机,实行正压人工呼吸。并将针形电极插入四肢皮下,记录标准肢体Ⅱ导联心电图。开胸暴露心脏,用4/0连线圆针从左心耳下1mm处浅层心肌穿过。假手术组只穿线不结扎。缺血再灌注模型组:在心肌和结扎线之间放置医用硅胶管(直径2mm)后结扎冠状动脉左前降支(LAD),以Ⅱ导ST段明显抬高,并且结扎线以下心肌颜色明显变暗为模型制备成功,缺血30min后松开结扎线,施行再灌注同时从大鼠股静脉注射生理盐水(10mL/kg),再灌注2h。参麦注射液治疗组:再灌注同时从股静脉给予参麦注射液(剂量为10mL/kg),其他均同模型组。
2009年6月温晓竞等:参麦注射液对大鼠缺血再灌注心肌结构的影响第3期2009年6月河北北方学院学报(医学版)第3期1.4 观察项目
1.4.1 心肌组织观察
取一小块结扎线下方变暗心肌,用10%甲醛固定24h,梯度乙醇脱水,二甲苯Ⅰ、Ⅱ透明各1.5h,浸蜡1.5h,石蜡包埋,切片(5μm),常规HE染色,OLYMPUS CX31型光镜观察。
1.4.2 心肌组织电镜观察
另取一小块结扎线下方变暗心肌,用2.5%戊二醛固定4h以上,PBS(pH7.4)洗涤,再用1%锇酸后固定1.5h,PBS洗涤,接着梯度丙酮脱水(每级15min),最后浸透(纯丙酮∶Epon812=1∶1)37℃24h,45℃24h,65℃24h。半薄定位,甲苯胺兰染色,修块,超薄切片,常规铀—铅染色,JEM100CⅫ型透射电镜观察。
参麦 治疗 组:间质出血很少;水肿轻微。肌细胞着色较均匀,局部结构已近正常,无肌溶和大片充、出血表现(见图1C)。
图1 光镜下各组心肌结构(×400)
(A:假手术组;B:模型组;C:参麦治疗组)
2.2 参麦注射液对心肌超微结构的影响
假手术组:心肌细胞质膜较清晰,无锯齿状表现,仅局部有波浪形表现;肌
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