妊娠期高血压疾病患者胱硫醚β合酶基因突变频率分析.doc

　　妊娠期高血压疾病患者胱硫醚β合酶基因突变频率分析 ：覃红萍,赵权英,李金平 【摘要】 目的 初步探讨同型半胱氨酸（Hcy）代谢相关酶胱硫醚β合酶(CBS)基因C572T基因突变频率在广西河池地区妊娠期高血压疾病(HDP)发病中的作用。 方法 采用等位基因特异性扩增(ASA)技术检测63例HDP患者（观察组）和32例孕期经过顺利的正常孕妇(对照组)CBS基因 C572T基因型。结果 HDP组CBS基因C572T T/T、C/T和C/C基因型频率分别为4.76%、84.13%和11.11%;对照组分别为3.13%、87.50%和9.37%;HDP组C等位基因频率为53.17%、T等位基因频率为46.83%,对照组分别为53.13%和46.87%,二者比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 CBS C572T基因突变频率与HDP发病无明显相关性,其基因突变频率可能不足以构成广西河池地区HDP发病的独立遗传危险因素。 【关键词】 妊娠期高血压疾病;胱硫醚β合酶;同型半胱氨酸;基因频率 【Abstract】Objective To study the effect of mutation frequency of cystathionine βsynthase(CBS) in patients en plification (ASA).Results The frequency of CBS gene type T/T,C/T and C/C utation frequency may not be independent risk factor for hypertensive disorder plication in He Chi population. 【Key ocysteine；gene frequency 妊娠期高血压疾病(Hypertensive disorder plication pregnancy,HDP)是威胁孕产妇健康的重要疾病,与产后出血、感染、妊娠合并心脏病一起构成孕产妇死亡的四大原因,其发病率为7%～10%,是导致孕产妇和围生儿发病率和死亡率增高的重要原因［1］。HDP的发病机制至今尚未完全阐明,临床观察发现其发生率在有HDP家族史的妇女明显高于无家族史者,认为遗传因素在HDP发病中有重要作用。近年来的研究认为HDP的发病与高同型半胱氨酸血症（Hyperhomocyseinemia,HHcy）存在相关性［2，3］。胱硫醚β合酶(Cystathionine βsynthase，CBS)为同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）代谢途径中的关键酶,其编码基因CBS基因突变可引起该酶活性的改变,从而影响Hcy代谢。本课题通过对广西河池地区HDP患者CBS基因突变频率检测,探讨其在HDP发病机制中的作用。 　 　资料和方法 　　1.研究对象 　　选取2007年5月至2008年9月在我院定期产前检查并住院分娩的HDP患者63例（观察组）,其中妊娠期高血压18例, 轻度子痫前期30例,重度子痫前期15例,诊断及分类标准参照乐杰主编的《妇产 科学 》第6版,孕妇年龄20～37岁,平均年龄24岁,孕周32～40周,平均37周。同时随机选取同期来我院住院分娩的、无妊娠并发症及合并症、孕期经过顺利的正常孕妇32例作为对照组,年龄22～35岁,平均25岁,孕周33～40周,平均36周。所有孕妇均为广西河池地区人氏，均无原发性高血压、糖尿病、慢性肾炎、心脏病等病史, 各组孕妇年龄及孕周比较差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。 2.研究方法 （1）标本的采集和处理 　　受试者清晨空腹抽取外周静脉血4 ml,2%EDTA抗凝,3000 r/min离心5 min，分离白细胞后采用酚/氯仿法提取人基因组DNA,并用8 g/L琼脂糖凝胶电泳检查基因组的完整性,紫外分光光度计检测DNA含量和纯度。 （2）CBS C572T基因型检测 　　采用等位基因特异性扩增（ASA）技术检测CBS 基因型。PCR反应试剂购于TaKaRa公司,琼脂糖为Biool/L dNTPS1 μl，10 μmol/L引物各2 μl，10×PCR缓冲液5 μl，Taq聚合酶1.25/U,25 mMol/L MgCl 23 μl。PCR反应扩增程序:95℃预变性2 min,然后95℃30 s,55℃30 s,72℃30 s,共35个循环,最后延伸72℃ 7 min。将PCR产物于15 g/L琼脂糖凝胶, 80 V电压下电泳35 min,溴化已锭染色,以DL2000为DNAMarker,凝胶成像系统观察带型并照相。 3.统计学方法 　　用SPSS11.5软件包处理数据。计量资料以均数±标准差（-±s）表示，组