气相色谱法测定杧果叶片中多效唑含量的研究.doc

　　气相色谱法测定杧果叶片中多效唑含量的研究 　　关键词气相色谱法;杧果叶片;多效唑;含量 　　AbstractThe experiment of paclobutrazol test in mango leaves atograph ple;standard curve method e of paclobutrazol in the chromatogram inutes. The improved method of sample front processes ore simple and pratical,hoping for reference to the researchers on the similar condition. 　　Key atograph test method;mango leaves;paclobutrazol;content 　　多效唑(Paclobutrazol)是1984年由英国卜内门(ICI)公司开发的一种内源赤霉素合成抑制剂[1]。其分子式为C15H20N3OCl。多效唑能抑制赤霉素的生物合成和由赤霉素所控制的生理效应,主要通过调节植物体内的激素平衡,延缓植物生长,抑制茎枝伸长,促进成花和坐果[2]。同其他植物生长抑制剂相比,多效唑具有用量少、价格低廉、效果明显等优点,因此目前已被广泛用于多种作物生产。 　　近些年来,在我国的杧果生产中,多效唑被大量应用于促花、花期调节以及诱导反季节开花[3]。而施用多效唑后,杧果植株对多效唑的吸收和转运以及其在植株体内的残留情况目前了解并不多,笔者就杧果叶片多效唑含量的气相色谱测定方法进行研究,以期为今后这方面的进一步研究提供参考。 　　 　　1材料与方法 　　 　　1.1仪器与试剂 　　仪器为气相色谱仪(BEIFEN SP-3400 气相色谱仪),配有HP-5色谱柱和FID检测器、捣碎机、旋转蒸发仪。试剂为甲醇、二氯甲烷、石油醚、丙酮(分析纯);氢氧化钠、无水硫酸钠、硅镁吸附剂等。 　　1.2样品处理 　　1.2.1 样品的制备。将杧果鲜叶片样品用水洗净、晾干,剪碎后放入捣碎机磨碎,精确称取10.0~15.0g放入三角瓶中,再加入70mL甲醇,在室温下放置1h,每隔20min晃动混匀1次。之后用布氏漏斗抽滤(抽滤时用3层滤纸,或重复抽滤2次,以确保滤液中没有固体物质),然后用50mL的甲醇淋洗2次,收集滤液,再加入30mL去离子水,混合均匀。在45℃恒温水浴下,用旋转蒸发仪减压浓缩至水相(终体积约为30mL),用预先配置的1moL/L的氢氧化钠将水相的pH值调节为11。将水相转移到125mL的分液漏斗中,加入30mL二氯甲烷,混合均匀,静置约10min使混合液充分分层(上层似乳浊液为水相,下层为二氯甲烷的有机相),放出下层液体,用三角瓶收集,再重复上述操作2次。合并3次收集的二氯甲烷有机相,在30℃恒温水浴下,用旋转蒸发仪减压浓缩至约5mL,待经层析柱净化。 　　1.2.2样品的净化。制备玻璃层析柱:玻璃管采用25mL的碱式滴定管,将下端的橡皮管一段去掉,只使用上端的玻璃管,用长的玻璃棒作为填充用的工具。底部垫入少许脱脂棉,依次填入2cm厚的无水硫酸钠、6g硅镁吸附剂、2cm厚的无水硫酸钠。先用20mL石油醚淋洗层析柱,然后将前面步骤中得到的提取液转移到层析柱内,最后用10mL石油醚/甲醇(石油醚∶甲醇=97∶3)溶液淋洗,收集淋洗液。放入干燥箱中蒸发至干,加入0.5mL丙酮,使蒸发干的物质完全溶解,待上机测定。 　　1.3多效唑标准样品的制备 　　准确称量0.012 6g含量为99.7%的多效唑标准品,用丙酮溶解,定容至25mL,然后取1.5mL,再稀释定容到25mL,此时的多效唑浓度为30mg/L,以此溶液作为标准液配制不同浓度的多效唑溶液。分别取30mg/L的多效唑溶液0.5、1.0、2.0、5.0mL定容至10.0mL,则溶液的浓度分别为1.5、3.0、6.0、15.0mg/L。 　　1.4检测参数设计 　　载气(高纯N2)流速:30mL/min;H2流速:40mL/min;空气流速:300mL/min;注样器温度:250℃;柱初温:50℃;柱终温:250℃;辅助箱温度:275℃;检测器温度:50℃;设定柱温、注样器、辅助箱、检测器极限温度均为300℃;毛细管FID升温速率不能超过20℃/min。 　　 　　2结果与分析 　　 　　2.1多效唑的定性分析 　　首先以高浓度(252mg/L)的多效唑溶液对多效唑的峰进行保留时间定性,由图1可以看出,在2min附近有一个很大的峰,此为溶剂丙酮的峰,另外一个比较明显的是位于15.087min的峰,此峰可确认为多效唑的峰,即多效唑在该测定条件下的保留