淫羊藿提取物的雌激素样作用研究.doc

　　淫羊藿提取物的雌激素样作用研究 ：于燕，颜虹，胡森科，张敬华 【摘要】 　　目的 评价淫羊藿提取物的雌激素样作用。方法 采用小鼠子宫增重实验、雌激素受体阳性细胞系(MCF7)细胞增殖及拮抗实验，评价淫羊藿及淫羊藿苷的雌激素样作用及其可能机制。结果 与阴性对照组比较，淫羊藿及淫羊藿苷能使子宫系数由0.097±0.008明显增加至0.156±0.018及0.152±0.016，且用药前、后动物体重由(18.9±1.3)g分别增至(19.8±1.3)g及(20.03±1.3)g，增幅明显高于阴性对照组(Plt;0.05)；淫羊藿苷可使血清雌激素E2由(132.22±11.45)ng/L增高至(147.73±12.43)ng/L，FSH水平由(50.15±3.36)μg/L降低至(44.47±2.46)μg/L(Plt;0.05)，但淫羊藿组雌激素E2水平无明显改变；在24、48、72h，淫羊藿及淫羊藿苷对MCF7细胞的增殖均有明显的促进作用(Plt;0.05)，分别由0.238±0.043、0.387±0.051、0.563±0.083增至0.362±0.045、0.521±0.046、0.648±0.043及0.324±0.043、0.465±0.034、0.622±0.079；72h加入ICI后，细胞增殖明显受到抑制，细胞增值率分别降至99.461%、94.434%。结论 淫羊藿及淫羊藿苷具有雌激素样作用，且其促细胞增殖作用可能是通过雌激素受体(ER)介导产生的。 【关键词】 淫羊藿 提取物 雌激素样作用 　　ABSTRACT: Objective To investigate the estrogenlike effects of Epimedium extractive. Methods By using the uterus groice and test of MCF7 proliferation and adding estrogen receptor antagonist Icariin, edium and Icariin and the possible mechanism. Results Epimedium and Icariin increased significantly the uterus coefficient in mice from 0.097±0.008 to 0.156±0.018 and 0.152±0.016, respectively; the (18.9±1.3)g to (19.8±1.3)g and (20.03±1.3)g (Plt;0.05). Icariin increased significantly the serum level of E2 from (132.22±11.45)ng/L to (147.73±12.43)ng/L and decreased FSH level from (50.15±3.36)μg/L to (44.47±2.46)μg/L (Plt;0.05), but there edium group. There 0.238±0.043, 0.387±0.051 and 0.563±0.083 to 0.362±0.045, 0.521±0.046 and 0.648±0.043 as edium and Icariin have estrogenlike effects and all of their effects are realized through the estrogen receptor. 　　KEY EM(高糖)、无酚红DMEM(高糖)、活性炭葡聚糖苷处理的胎牛血清(CDTFBS)为Hyclone公司产品；小牛血清( 中国 医学 科学 院生物工程研究所)；E2、MTT、DMSO(Sigma公司)；ICI 182，780(Tocris公司)。雌激素敏感性人乳腺癌MCF7细胞购自中科院细胞生物研究所细胞库。CO2培养箱(BD)；酶联免疫检测仪(EPSON LX800)；倒置显微镜(Olympus)。 　　1.4 细胞培养 　　人乳腺癌细胞系MCF7于含100mL/L小牛血清的DMEM高糖溶液中培养，培养条件为37℃、50mL/L CO2、相对饱和湿度。实验开始前4d将细胞用PBS洗涤2次后，改为在无酚红DMEM(含50mL/L CDTFBS)中培养，以耗尽细胞内储存的雌激素。 　　1.5 MTT细胞增殖实验 　　MCF7细胞经无酚红DMEM(含50mL/L CDTFBS)培养4d后，选取对数生长期细胞，用2.5g/L胰蛋白酶消化，PBS(pH 7.4)洗2次，加入无血清DME