HPLC-ELSD法检测石榴中游离糖.docVIP

HPLC-ELSD法检测石榴中的游离糖含量建立一种HPLC-ELSD分析方法,测定白皮甜石榴和红酸石榴2个不同品种石榴中的可溶性游离糖。[方法]采用超声水溶解提取石榴的游离糖分,以乙腈-水为流动相,氨基色谱柱,应用HPLC-ELSD测定其中的糖分组成及含量。[结果]当乙腈-水体积比为8020时,各游离糖组分分离效果良好。甜、酸石榴中的可溶性游离糖分均为果糖和葡萄糖。果糖的标准回归方程为lnCFru=-14.9440+0.9424lnAFru,线性范围0.18～2.77mg/ml;葡萄糖的标准回归方程为lnCGlu=-14.0600+0.9271lnAGlu,线性范围0.48～7.44mg/ml。白皮甜石榴中果糖和葡萄糖的含量分别为7.58%、6.66%,红酸石榴中的含量分别为3.18%、3.74%。[结论]甜石榴总游离糖含量是酸石榴的2倍,所建立的分析方法对水果糖类的测定具有一定的实际应用价值石榴汁中部分多酚类物质的分离目的:分离鉴定天然石榴汁中主要多酚类物质。方法:采用乙酸乙酯、正丁醇萃取多酚类物质,并应用液质联用分析方法,对其有关成分进行鉴定。结果:初步分析结果表明,石榴汁中含有鞣花酸、石榴素、芹菜配基、芹菜配基-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、芦丁、3,3′,4′,5,7-五羟基黄烷酮、3,3′,4′,5,7-五羟基黄烷酮-6-D-吡喃葡萄糖苷。结论:石榴汁中多酚类物质含量丰富,有必要进行深入研究,以明确其主要功能成分 1．方法特点：重铬酸钾容易提纯，溶液性质稳定，可以直接配制标准溶液。氧化能力虽没有高锰酸钾强，但在室温下不会氧化Cl-，Cl-存在时不构成干扰。 2．重铬酸钾标准溶液配制： 按照消耗0.1×0.02摩尔基准物质估算其称取量，在1—1.2倍范围内准确称量W 重铬酸钾，溶解，定容到所需体积V。 计算浓度公式： 18.8 方法应用实例：测定水的化学耗氧量、碘量法中用于标定硫代硫酸钠标准溶液的浓度。 2碘量法 1．方法特点：碘电对I2 /I－标准电极电位值适中。I2有氧化性但较弱，可以直接滴定较强的还原剂如VC。而I－有较强的还原性，可以测定多种氧化剂。I2 /I－电对反应可逆性好，副反应少，可以在酸性介质或碱性介质中滴定。滴定时用淀粉作指示剂，判断终点敏锐。因此碘量法应用范围广泛。碘在水中溶解度小，加KI形成I3－增加溶解度。碘不能直接配制标准溶液，需要标定。 直接碘量法和间接碘量法。 直接碘量法：用I2标准溶液作氧化剂直接滴定还原性样品。滴定只能在酸性溶液中进行。碘的基本单元为1/2 I2。 间接碘量法（滴定碘法）：以I－（KI）作还原剂与氧化性样品反应生成单质I2，再用硫代硫酸钠Na2S2O3标准溶液滴定生成的I2。滴定反应的化学计量关系为：n（样品中待测成分）= n （1/2 I2 ）= n （Na2S2O3）。 3．标准溶液配制及标定： （1）Na2S2O3标准溶液的配制和标定： 硫代硫酸钠晶体含杂质、易风化，不能直接配制标准溶液。计算所需硫代硫酸钠晶体质量，粗称，用新煮沸除去二氧化碳杀灭细菌的水溶解，稀释到需要的体积。加入少量碳酸钠，储存于棕色瓶中放置3—5天，取上层清液标定。 Na2S2O3标准溶液用K2Cr2O7作基准物质标定。按照消耗0.1×0.02摩尔1/6K2Cr2O7计算其质量，在1—1.2倍范围内准确称量W 重铬酸钾，加水溶解。加入过量KI，加硫酸酸化，放暗处5分钟，使反应充分进行。再加水稀释，用Na2S2O3标准溶液滴定生成的碘到浅黄色时加淀粉，滴定到兰色退去。记录消耗Na2S2O3标准溶液的体积V。 计算Na2S2O3标准溶液的准确浓度： 根据n（1/6K2Cr2O7）= n （1/2 I2 ）= n （Na2S2O3）。 得到的公式： 18.9 （2）碘标准溶液的配制和标定 根据所需质量粗称碘晶体，与KI一起加水研磨，再加水到所需体积，储存于棕色瓶中。用已经标定过的硫代硫酸钠标准溶液标定其准确浓度。吸取25.00毫升硫代硫酸钠标准溶液于锥形瓶中，加淀粉指示剂，用碘溶液滴定到兰色。根据C（Na2S2O3）× V硫代硫酸钠=C（1/2 I2）×V碘计算碘标准溶液准确浓度。 4．方法应用实例及测定结果计算 例一 测定维生素C药片中VC的含量。称取维生素C药片研成的粉末0.2071克, 溶解定容到100毫升。取出10.00毫升放入三角瓶,加酸和淀粉指示剂后,用浓度C(1/2 I2)= 0.009707 mol/L的I2标准溶液滴定到浅蓝色, 消耗I2标准溶液17.42毫升。计算药片中维生素C的质量分数。 解：I2与VC反应，每摩尔物质得、失电子的摩尔数分别是2、2，因此它们的基本单元分别是1/2 I2和1/2 Vc ，基本单元的摩尔质量数值分