4种金属离子对卡拉白鱼消化组织淀粉酶活性影响.docVIP

4种金属离子对卡拉白鱼消化组织淀粉酶活性影响鱼类淀粉酶是碳水化合物水解酶类的一种，淀粉酶活性的高低决定着鱼类对营养物质中淀粉的消化吸收能力，从而影响其生长发育的速度，甚至有决定性作用。同时，鱼类淀粉酶的活性也是饵料中添加淀粉量的一个参照标准，从而能起到降低饵料系数，提高饵料的消化利用率，降低生产成本，提高经济效益的作用。但诸如鱼类消化器官的组成、消化器官内温度、pH值、无机离子等均是影响鱼类淀粉酶稳定性与活性的重要因素，在这些因素中无机离子便是较为重要的一种[1-2]。 咸海卡拉白鱼（Chalcalburnus chalcoides aralensis）简称卡拉白鱼，隶属鲤科、雅罗鱼亚科、卡拉白属[3]，主要分布在欧洲中部黑海、咸海以及里海西部和南部。卡拉白鱼鳞薄、头小、无细刺，可食比例大、肉质细腻、味道鲜美，具有较高的营养价值和良好的适口感，还具有抗病性强、耐盐碱等优良性状，是欧亚名贵的珍稀鱼类[4]。自2001年卡拉白鱼成功引种后，其生物学特性、胚胎、染色体、盐碱性适应范围等研究已经陆续开展，但关于卡拉白鱼消化酶方面的研究却尚无报道[5-7]。基于此，笔者研究了4种金属离子对卡拉白鱼消化组织淀粉酶酶促反应的影响，旨在为丰富卡拉白鱼消化生理提供基础数据，以期为卡拉白鱼的规模化养殖提供理论指导。 1材料与方法 1.1试验材料 试验用卡拉白鱼购于天津市天祥水产有限责任公司，体表无伤，体质良好，体长（17.59±1.38）cm，体重（30.30±4.18）g，水族箱中暂养14 d。试剂：NaCl、KCl、CaCl2·2H2O、MgCl2·6H2O溶液，均为分析纯。 1.2试验方法 1.2.1粗酶液的制备。将已停食48 h的卡拉白鱼置于冰盘内解剖，剥取肝胰脏与肠（肠等分为前、中、后3段）组织，剔除脂肪与结缔组织，剪开肠道，去除内容物，用预冷的生理盐水冲洗组织，并用吸水纸吸干表面水分。将同一组织剪碎并称重，按照质量与体积比1∶9的比例加入冷却生理盐水，使用电动匀浆机匀浆，再用高速冷冻离心机在12 000 r/min的条件下低温离心20 min，上清液即为粗酶液，4 ℃条件下保存，24 h内分析完毕。 1.2.2金属离子来源及浓度设置。Na+、K+、Ca2+、Mg2+分别来源于NaCl、KCl、CaCl2·2H2O、MgCl2·6H2O，浓度梯度均设置为：25、50、75、100、125、150 mmoL/L。所有梯度均设3个重复，以不加离子组（0 mmoL/L）为对照。 1.2.3酶活性的测定。淀粉酶活性的测定采用碘淀粉显色法[8]。淀粉酶活性单位：以30 min内，1 g组织中的淀粉酶在30 ℃下能完全水解10 mg淀粉为1个酶活力单位，记为mg/（30 min·g）。 1.3数据处理 所有数据用SPSS 17.0软件进行统计学分析，采用ANOVA单因素方差分析和Duncan′s多重比较对试验结果在0.05水平下进行显著性检验。 2结果与分析 2.1K+对卡拉白鱼消化组织淀粉酶活性的影响 在设定的离子浓度范围内，K+对卡拉白鱼肝胰脏、前肠、中肠和后肠淀粉酶活性具有不同程度的激活作用；在设定浓度范围内，K+对肝胰脏淀粉酶活性具有明显促进作用（P0.05）（表1）。 2.2Na+对卡拉白鱼消化组织淀粉酶活性的影响 Na+在25~150 mmol/L范围内，卡拉白鱼肝胰脏淀粉酶活性随Na+浓度增加而明显增加，且150 mmol/L促进作用最大，酶活性为103.53 mg/（30 min·g）；Na+对前肠淀粉酶虽有促进作用，但只在75~100 mmol/L促进作用明显（P0.05）（表1）。 2.3Mg2+对卡拉白鱼消化组织淀粉酶活性的影响 在设定的浓度范围25~150 mmoL/L内，肝胰脏、前肠、中肠和后肠淀粉酶活性均表现为随Mg2+浓度增加而减小；其中Mg2+浓度为150 mmol/L对肝胰脏酶活性有显著抑制作用（P0.05），浓度为25 mmol/L对肝胰脏酶活性具有明显促进作用（P0.05）；Mg2+对前肠表现明显的促进作用，且25 mmoL/L对前肠酶活性促进作用最大，其淀粉酶活性为103.39 mg/（30 min·g）（P0.05）；Mg2+对中肠和后肠均表现为抑制作用，其中浓度超过75 mmoL/L时，对中肠淀粉酶抑制作用显著（P0.05）；浓度超过100 mmoL/L时，对后肠淀粉酶抑制作用明显（P0.05）（表1）。 2.4Ca2+对卡拉白鱼消化组织淀粉酶活性的影响 在设定的浓度范围25~150 mmol/L内，Ca2+对卡拉白鱼肠及肝胰脏具有不同程度的抑制作用，且随着离子浓度的增加淀粉酶活性降低，其中超