HIF-1α、VEGF-A和MMP-9在脊索样脑膜瘤中的表达及意义.pdfVIP

广东医学 2014年7月第35卷第 13期 GuangdongMedicalJournalJu1．2014，Vo1．35，No．13 · 2051 · HIF—loL、VEGF—A和 MMP一9在脊索样脑膜瘤中 的表达及意义米 何伟，沈晓黎 ，王大鹏，张焱，吴雷，祝新根 南昌大学第二附属医院神经外科(南昌330006) 【摘要】 目的 研究缺氧诱导因子1 (hypoxia—induciblefactor1一alpha，HIF一1)、血管 内皮生长因子A (vascularendothelialgrowthfactora，VEGF—A)、基质金属蛋白酶9(matrixmetallopr0teinase9，MMP一9)与脊索样 脑膜瘤(chordoidmeningioma，CM)血管新生和浸润的关系。方法 采用免疫组化、蛋白印迹分析 (Westernblot)和 酶联免疫法(RT—PCR)检测HIF一1OL、VEGF—A、MMP一9在蛋白质和mRNA两个水平上的表达，同时采用CD34 标记微血管密度(microvesseldensity，MVD)，研究HIF一1、VEGF—A、MMP一9与CM血管新生及复发的相关性。 结果 与正常脑组织和WHOI级脑膜瘤相比，HIF—l、VEGF—A、MMP一9在 CM 中明显表达 (P0．05)，与非 典型脑膜瘤相比，CM 中表达虽多但差异无统计学意义 (P0．05)；HIF一1OL、VEGF—A在与 MVD呈正相关且差 异有统计学意义(r=0．930，r2：0．916，均P0．01)。结论 HIF一1、VEGF—A、MMP一9促进CM新血管生 成，进一步影响肿瘤浸润和复发 ，可做为术后辅助抗血管治疗以降低其复发率的分子靶点。 【关键词】 缺氧诱导因子1；血管内皮生长因子A；基质金属蛋白酶9；脊索样脑膜瘤 脑膜瘤为起源于蛛 网膜细胞的颅 内常见 良性肿 technology)。(2)RT—PCR内参及引物设计：选择表达稳 瘤，占颅脑肿瘤的20％。依据WHO2007年中枢神经 定的脑膜瘤 31一actin作参照物，MMP一9、VEGF、HIF一 系统肿瘤 中脑膜瘤的分类分级标准，脊索样脑膜瘤 1、B—actin引物序列据参考文献、Genebank资料由 (chordoidmeningioma，CM)属于WHOlI级脑膜瘤 ，在 PrimerPremier6．0设计，上海生物工程公司合成。HIF一 脑膜瘤 中约占0．5％～1％，具有较高的浸润性和复发 1 上游引物：5一GGAAAcTTCT(ATCCTGGTGAT一3， 率 ，成为临床治疗的难题，因此值得对其相关分子机 下游弓I物：5～cAcTTcATTCTGAGAAAAAAGCTTC～3， 制深入研究。 扩增片段310bp；MMP一9上游引物：5一CGCCAGTC． 1 资料与方法 CACCCTTGTGCTCTI一3，下游 引物：5 一CTCACCG— 1．1 一般资料 取我院2009年 1月至2013年9月术 GTCTCGGGCAGGGACAGT一3，扩 增 片段 t86bp； 前颅脑影像学检查提示为脑膜瘤，术后病理报告证实为 VEGF—A上游 引物：5 一AGCGCAGCTACTGCCATC— 脑膜瘤的样本77例，其中男27例，女 50例，年龄2l～ CAATC一3，—F游 弓I物：5一cGTACACGCTCCAGGAcT— 68岁，平均 (46．69±12．75)岁。依据 WHO2007中枢 TATACCG一3，扩增片段 357bp；13一actin上游引物： 神经系统肿瘤脑膜瘤分类：I级脑膜瘤组54例 ，其中 5一CCGGGACCTGACTGACTACCTCA一3，下游 弓I物： 脑膜内皮细胞型21例、纤维型 11例、过渡型9例、砂 5一GGACTCGTCATACTCCTGCITI1GCTG一3，扩增片段 粒型6例、血管瘤型5例、分泌型2例；Ⅱ级脑膜瘤组 550bp。 23例，其 中非典型脑膜瘤9例 、脊索样型 11例、透明细 1．3 实验方法 (1)免疫组化和 MVD测定 ：脑膜瘤 胞型3例。