IL-32对HepG22.15细胞凋亡的影响.pdfVIP

第 45卷第 3期第 253页 华中科技大学学报 (医学版) Vo1．45 No．3 P．253 2016年 6月 ActaMedUnivSeiTeehnolHuazhong Jun． 2016 IL一32对 HepG22．15细胞凋亡 的影响* 潘兴飞 ， 孙媛丽 ， 贺 琪 ， 尹旺春。， 符明鹏。， 沈关心 ， 朱慧芬。△ 广州医科大学附属第三医院感染科 ，广州 510150 华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系，武汉 430030 摘要 ：目的 研究 白细胞介素一32(IL一32)对 乙型肝炎病毒 (HBV)感染的肝细胞 (HepG22．15细胞 ，插入 HBV全基 因组，持续表达)凋亡的影响。方法 将不 同浓度 的 IL-32(O～0．4~g／mL)蛋 白质与 HepG2细胞、HepG22．15细胞共 培养，48h后用 MTT检测细胞增殖。收集与 IL-32共培养 48h的HepG2细胞、HepG22．15细胞 ，加入AnnexinV和 PI，室温避光孵育 15min，流式细胞仪检测细胞凋亡 。将 IL-32(O．2~g／mL)与 HepG2细胞 、HepG22．15细胞共培养 ，分 别于 0、12、24h后收集细胞 ，HumanActiveCaspase-3Immunoassay检测试剂盒检测活化 的 Caspase-3表达水平 ， Caspase-3Colorimetric检测试剂盒检测 Caspase-3酶活性。结果 IL-32抑制 HepG2细胞、HepG22．15增殖 ，诱 导 HepG2细胞、HepG22．15细胞凋亡 ，且随着 IL-32浓度 的增高，细胞凋亡水平亦增高 。IL-32诱导 HepG2细胞、HepG2 2．15细胞活化 的Caspase-3表达水平及 Caspase-3酶活性均增加 。结论 IL-32可能通过活化 Caspase-3通路诱导 HBV 感染的肝细胞凋亡而发挥抗病毒作用，同时亦参与慢性乙型病毒性肝炎肝损伤的发生。 关键词 ：白细胞介紊一32； 肝细胞 ； 乙型肝炎病毒 ； 细胞凋亡 ； Caspase-3 中图分类号 ：R392．114 DOI：10．3870／j．issn．1672—0741．2016．03．003 Effectoflnterleukin-32ontheApoptosisofHepG22．15Cells PanXingfei，SunYuanli。，HeQietal 1DepartmentofInfectiousDiseases，The3rdAfftliatedHospital，CruangzhouMedicalUniversity， Guangzhou510150，China DepartmentofImmunology，SchoolofBasicMedicalSciences，TongjiMedicalCollege， HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430030，China Abstract Objective Toinvestigatetheeffectofinterleukin-32(II，32)ontheapoptosisofHepG22．15cellsinwhichthe wholegenomeOfHBV wasinsertedandpersistentlyexpressed．Methods HepG2cellsorHepG22．15cellsweretreatedwith differentconcentrationsofI 32(o-o．4~g／mL)．Forty-eighthourslater，cellproliferationwasassayedbyMTTmethod．Cell apoptosiswasassayedbyflow cytometry(FCM