KLK14基因沉默对 OVCAR-3细胞凋亡和迁移能力的影响.pdfVIP

· 654 · 郑州大学学报(医学版) 2014年 9月 第 49卷 第5期 doi：10，13705／jissn．167l一6825．20l4．05．0l6 KLK14基 因沉默对 OVCAR一3细胞凋亡和迁移能力的影响 张瑞涛，史惠蓉 ，任 芳，陈志敏，贾艳艳，冯 巍 郑州大学第一附属医院妇科 郑州 450052 #1~itK作者 ，女，1956年4月生 ，博士，主任医师，教授 ，研究方 向：妇科肿瘤 ，E—mail：huirongshizzu@yahoo．com 关键词 人组织激肽释放酶 14；RNA干扰 ；OVCAR一3细胞 ；凋亡 ；迁移 中图分类号 R737．3l 摘要 目的：观察沉默人组织激肽释放酶 l4(KLK14)基因对人卵巢癌 OVCAR一3细胞凋亡和迁移能力的影响。 方法 ：高表达 KLK14的OVCAR一3细胞分为 3组，实验组 以KLK14shRNA转染细胞 ，对照组转染对照 shRNA，空 白 组不处理 。分别采用 RT—PCR和 Westernblot检测 3组细胞 KLK14mRNA和蛋白的表达 ，采用 TUNEL法检测细胞 凋亡情况 ，Transwell小室检测迁移细胞数 ，Westernblot法检测 OVCAR一3细胞 中Caspase一3、Caspase一9、MMP2和 MMP9的表达 。结果：与空 白组和对照组相 比，实验组 KLK14mRNA和蛋 白的表达降低 (F=187．861和 167．374，P 均 0．05)；OVCAR一3细胞凋亡增加 ，细胞迁移 能力受抑 (F=54．313和85．283，P均 0．05)；Caspase一3和 Caspase一 9蛋白的表达增加 (F=l39．471和91．308，P均 0．05)，MMP2和 MMP0蛋 白的表达减少 (F=48．2l9和 61．941，P 均 0．05)。结论 ：下调 KLK14的表达可抑制 OVCAR一3细胞 的恶性行为 ；KLK14可作为卵巢癌治疗干预的 目标 。 EffectsofRNA interference targetingkallikrein—relatedpeptidase 14 on apoptosisandmigration ofOVCAR一3cells ZHANGRuitao，SHIHuirong，REN Fang，CHENZhimin，JlAYanyan，FENG Wei DepartmentofGynecology，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052 Keywords kallikrein—relatedpeptidase14；RNA interference；OVCAR一3cell；apoptosis；migration Abstract Aim ：ToinvestigatetheeffectofKLK14 inhibitionbyRNA interferenceontheapoptosisandmigration in humanovariancarcinomaOVCAR．3cells．Methods：KLKI4smallhairpinRNA(shRNA)wastransfectedintoOVCAR一3 cellswithhighexpressionofKLK14(experimentalgroup)．ThecellstransfectedwithcontrolshRNA(controlgroup)andthe cellswithouttreatment(blankcontrolgroup)werethecontro1．RT—PCRandWesternblotwereusedtodetecttheexpressions ofKLK14mRNA andprotein．ApoptosisandmigrationwereobservedinOVCAR-3cellsbyTUNEL andTranswellchamber assay，andtheexpressionsofCaspase一3，Caspase一9，MMP2andMMP9wereexaminedbyW esternblot．Results：Compared