miRNA-208b在SD大鼠腹主动脉缩窄心肌肥厚中的表达.pdfVIP

广东医学 2014年7月第35卷第 14期 GuangdongMedicalJournalJu1．2014，Vo1．35，No．14 · 2141 · 基 础 研 究 miRNA一208b在 SD大鼠腹主动脉缩窄 心肌肥厚中的表达术 吴菊清，欧阳伟 ，冯会娟，孙云钢，李师思，陈盼，冼嘉朗，黄柳华 南方医科大学珠江医院核医学科(广州510282) 【摘要】 目的 建立腹主动脉缩窄(AAC)大鼠心肌肥厚动物模型并分析大鼠心肌肥厚过程 中microRNA一 208b(miRNA一208b)动态差异性表达。方法 大鼠40只，平均分为AAC组和假手术组(Sham组)，AAC组通过 AAC的方法建立大鼠心肌肥厚模型，采用miRNA芯片法筛查和 实时荧光定量PCR技术 (qRT—PCR)分别检测 AAC组与Sham组大鼠心肌 中miRNA一208b表达的动态变化。结果 (1)心肌肥厚模型的建立：①心脏指数变化： AAC组大鼠在5、10、15、20d心脏指数均值稳步上升，与Sham组相比，除5d时心脏指数差异无统计学意义 (P 0．05)，10、15、20d心脏指数差异有统计学意义(P0．05)。②组织学染色示：AAC组5d时大鼠心肌细胞排列正 常，无明显肥大现象；10d时大鼠部分心肌细胞排列紊乱，体积增大；15、20d时大鼠心肌组织排列紊乱，心肌细胞 明显肥大，胞浆丰富，细胞间隙不明显，细胞核增大。此均可证明大鼠心肌肥厚模型建立成功。(2)miRNA一208b 基因芯片筛查及 qRT—PCR检测：①基 因芯片筛查实验结果显示，AAC组大鼠心肌中miRNA一208b在 5、10、15、 20d分别是Sham组的0．8282、1．9514、1．2919、1．3296倍，高峰在 10d出现。@qRT—PCR结果显示，AAC组大 鼠心肌中miRNA一208b在5、10、15、20d分别为Sham组(设Sham组中的miRNA一208b表达量为 1)的相对表达 倍率是(2．65±0．49)、(1．27±0．31)、(1．34±0．69)、(3．45±0．27)倍。与Sham组相 比，AAC组miRNA一208b表 达在5d和20d时差异均有统计学意义(P0．05)；但在 10d和 15d时差异均无统计学意义(P0．05)。结论 在AAC大鼠中，miRNA一208b表达呈动态差异性变化，且在早期表达较高，先于心肌细胞发生形态学变化，可能 成为心肌肥厚早期诊断和干预治疗的新途径。 【关键词】 微小RNA；心肌肥厚；PCR；基因芯片；早期诊断；动物模型 DynamicdifferentexpressionofmiRNA ——208bincardiachypertrophymodelinducedbyabdominalaorticcoarc- tationinSDrats． U 一qing，OU ng—wei，FENGHui—juan，SUNYun一 ，LIShi—si，CHENPan，XIAN Jia—lang，HUANGLiu—hua．DepartmentofNuclearMedicine，ZhujiangHospital，SouthernMedicalUniversity，Guang— zhou510282，China Co~espondingauthor：OU yⅡ —wei．E—mail：oyw88@tom．com A【bstract】 Objective Toestablishmyocardialhype~rophyanimalmodelinducedbypa~iMabdominalaortaco— arctation(AAC)andtoinvestigatethedynamicexpressionofmicroRNA一208b(miRNA一208b)inSDrats．Methods FortySD ratswererandomlydivided intotheAAC group，in whichmyocardialhypearophywasinduced byAAC，and sham—operationgroup(Sham group)．ThedynamicexpressionofmiRNA一208bwasmeasuredbymicroarrayassayand real—timequantitativereversetranscri