苦参碱抑制人雄激素非依赖性PC3细胞增殖和诱导凋亡的研究.docVIP

　　苦参碱抑制人雄激素非依赖性PC3细胞增殖和诱导凋亡的研究 ：张鹏，王子明，纪宗正，种铁，黄辰，高彩霞 【摘要】 目的 研究苦参碱对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC3增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法 不同浓度苦参碱作用PC3细胞后，应用MTT法观察苦参碱对PC3细胞增殖的影响，流式细胞仪研究苦参碱对PC3细胞周期的影响，TUNEL法、Annexin V/PI双染分析苦参碱对PC3细胞凋亡的影响。结果 苦参碱对PC3细胞的生长具有抑制作用，与对照组相比有统计学差异(Plt;0.05)。苦参碱对PC3细胞的增殖抑制作用呈现时间及剂量依赖性关系。苦参碱的最佳药物浓度为1.0g/L，最佳作用时间为48h。流式细胞仪分析显示不同浓度苦参碱均可使PC3细胞阻滞于G0/G1期，随着苦参碱浓度的增加，G0/G1期细胞所占的比例增加，与对照组相比有统计学差异(Plt;0.01)。TUNEL法、Annexin V/PI分析显示不同浓度苦参碱均可诱导PC3细胞凋亡，其早期凋亡率及晚期凋亡率随着苦参碱浓度的增加而升高，呈现剂量依赖性关系(Plt;0.05，Plt;0.01)。结论 苦参碱在体外可抑制PC3细胞的增殖，具有时间和浓度依赖关系。抑制增殖和细胞周期阻滞与G0/G1期相关。苦参碱可诱导PC3细胞凋亡，与苦参碱的作用浓度及时间有关。 【关键词】 前列腺癌;苦参碱;细胞凋亡 　　ABSTRACT: Objective To investigate the effects of matrine on the proliferation, cell cycle, apoptosis of androgen independent prostate cancer (AIPC) cell line PC3 in vitro. Methods PC3 cells atrine. The inhibitory effect of matrine on the proliferation of PC3 cells ethod. The cell cycle of PC3 cells treated by matrine etric assay. Apoptosis of PC3 cells induced by matrine ined atrine had an inhibitory effect, that of controls (Plt;0.05). Matrine markedly inhibited cell proliferation of PC3 in dose and timedependent manners. The optimal dose of matrine e of inhibition etric assay shoatrine atrine dose, that of controls (Plt;0.01). TUNEL and Annexin V/PI staining assay shoatrine could obviously induce the apoptosis of PC3 cells. The ratio of early and late apoptosis of PC3 cells treatedby matrine anner (Plt;0.05, Plt;0.01). Conclusion Matrine could inhibit the proliferation of PC3 cells in dose and timedependent manners in vitro. The inhibition mechanism ight be associated e of matrine. 　　KEY A)是中药苦参的主要有效成分[1]。研究表明苦参碱对肺癌、卵巢癌等的细胞生长具有抑制作用[23]，这种作用与其诱导肿瘤细胞凋亡有关。本实验通过不同浓度的苦参碱作用于AIPC细胞株PC3，研究苦参碱对PC3细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 细胞株 人AIPC细胞株PC3由西安 交通 大学环境与疾病相关基因 教育 部重点实验室提供。该细胞系于一位62岁白人男性前列腺癌患者的骨转移灶，其酸性磷酸酶和5α还原酶活性低，不产生前列腺特异性抗原(prostate specific antigen, PSA)，不表达雄激素受体。 　　1.1.2 主要试剂 苦参碱由西安鸿生生物科技有限公司惠赠，纯度gt;980g/L。胎牛血清、RPMI1640培养液、四甲基偶氮唑蓝溶液