本科实验1.pptVIP

实 验 一 微生物实验室规则 实验室生物安全 油镜使用与保养 细菌革兰染色（完成实验报告1） 细菌基本形态观察(完成实验报告1) 医学微生物学实验目的 学习医学微生物学理论知识的基础上，加深理解并验证和巩固理论知识; 学习微生物学的基本操作技术; 训练观察、思考和分析问题的能力、独立学习和独立工作的能力以及严格的科学作风，严肃的科学态度和严密的工作方法。 实 验 室 规 则 ? 进实验室只带必要的文具、书本，并穿工作服（白大衣）。其它个人物品尽量不带入实验室。书包按学号放入书包柜。 实验室内应保持安静清洁，禁止饮食，不得喧哗或嬉戏。 实验前预习，按照实验计划进行实验，严格遵守操作规程。爱护实验室内的显微镜等贵重仪器。 节约实验试剂，实验室内物品不得带出室外。 注意安全，若带菌材料污染桌面、地板、书籍和衣物或误吸入口，应立即报告教师进行处理。 用过的带菌材料如吸管、玻片等应放在消毒缸、消毒箱等消毒区，污染物放到指定的地方统一处理，不得放在桌上或冲洗于水槽内。清理桌面，洗手后方可离室。值日同学负责湿性打扫实验室，并关好水、电、门窗。 实验室生物安全 我国的实验室及其从事实验活动的人员生物安全管理，按国务院令(第424号)《病原微生物实验室生物安全管理条例》于2004年11月起施行。 病原微生物，是指能够使人或者动物致病的微生物。实验活动，是指实验室从事与病原微生物菌（毒）种、样本有关的研究、教学、检测、诊断等活动。 生物安全水平分级 根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将生物安全防护水平（biosafety level，BSL）分为4级，以表示实验室的相应生物安全防护水平。 BSL-1：防护水平最低,,普通建筑物即可，每个实验室应设洗手池。 BSL-2：实验室的门有可视窗。在实验室工作区域外还应当有供长期使用的存储空间。在实验室内使用专门的工作服；应戴乳胶手套。配备高压蒸汽灭菌器，在实验室内配备生物安全柜。有可靠的电力供应和应急照明。 BSL-3：自成隔离区（有出入控制）或为独立建筑物。 BSL-4：防护水平最高。实验室应建造在独立的建筑物内或建筑物中独立的完全隔离区域内，该建筑物应远离城区。 生物安全柜（Biological safety cabinets，BSCs）是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。 使用生物安全柜可以减少由于气溶胶暴露所造成的实验室感染以及培养物交叉污染。同时也能保护环境。 油镜使用与保养 用100倍的物镜头，加镜油（锥形瓶上方为松柏油，它与玻璃介质折光率相近，避免光线折射）。 镜头一定要完全浸入油中。 调好瞳孔距离，先转动粗调节器（向前），再换用细调节器。 最后用二甲苯擦镜头（锥形瓶下方液体），向同一个方向檫，不要来回檫，损伤镜头。 显微镜归位。 集光器 目镜 视网膜 物镜 革兰染色 safranin Crystal violet 方法： 制片：涂片、干燥、固定 染色： 初染（结晶紫1’）→水洗 媒染（碘液1’）→水洗 脱色（95%酒精30”）→水洗 　复染（稀释复红30”）→水洗 滤纸吸干 油镜镜检 Structure of a Gram-Negative Cell Wall Structure of a Gram-Positive Cell Wall Smear preparation Staining Heat fixing crystal violet stain wash with water Stain with grams iodine solution Decolorize by adding 95% alcohol Counterstain with Safranin 革兰染色的意义 鉴别细菌 与致病性有关 选择抗菌药物 细菌基本形态观察 球形： 葡萄球菌（Staphylococcus） 链球菌（Streptococcus） 脑膜炎球菌（Meningococcus） 杆形：伤寒杆菌（Bacillus typhi） 螺形菌：霍乱弧菌（Vibrio cholera） Staphylococcus aureus Streptococcus Meningococcus Bacillus typhi Vibrio cholera