氯胺酮对幼龄大鼠学习记忆功能和海马糖原合酶激酶3β活性的影响.doc

麻醉学基础研究 氯胺酮对幼龄大鼠学习记忆功能和海马糖原合酶激酶3β活性的影响 戴泽平 郑学杰 谢灵燕 谭永胜 朱美芳 唐宁 鲁卫华 皖南医学院弋矶山医院麻醉科（241001） [摘要]：目的 观察腹腔注射氯胺酮对幼龄大鼠空间学习记忆功能和海马GSK-3β活性的影响。方法 健康月龄雄性SD大鼠40只随机分为4组：对照1组（C1组）、对照2组（C2组）、氯胺酮四天组( K1组)、氯胺酮二十一天组( K2组)、每组10只。K1、K2组腹腔注射氯胺酮40mg/kg，随后每隔15min追加1/2首剂量，共追加3次，对照组给予生理盐水，各组于给药后1、2、3、4、18、19、20、21天行水迷宫试验，并于末次水迷宫实验结束后1小时断头取脑，应用免疫组化测海马GSK-3β的含量。结果 与C1组比较，K1组逃避潜伏期显著延长(P0．01)，海马神经元中GSK-3β密度显著增加（P﹤0.05）光镜下各组大鼠海马神经元结构未见明显异常 结论 腹腔注射氯胺酮可导致幼龄大鼠早期功能障碍，海马区GSK-3GABA和谷氨酸对中枢神经系统 (CNS) 早期发育的影响 神经递质从CNS发育的极早期就存在于神经细胞的化学微环境中，在人类胚胎中，最早可于孕六周时探测到GABA的活性细胞，这一时期于大脑结构开始形成期相一致。谷氨酸，成人CNS中重要的兴奋性氨基酸，也是CNS发育中一种最充足的神经递质，神经干细胞，迁移的神经母细胞和未成熟的神经元表达神经递质的特定受体，因而，除了在成熟的神经元环路中对神经传导所起的作用外，GABA和谷氨酸可以作为化学传递信号诱导各种形态学变化[3,4]。这些作用通过旁分泌，弥散的方式（至少部分的）进行调节，在这种方式中GABA和谷氨酸通过非突触方式释放到早期分化中的皮质环境中并激活相应的离子通道受体，这种早期的神经递质信号传递方式可能调节大多数的发育过程，包括增殖，分化和突触形成[5]。 GABA和谷氨酸在祖细胞增殖中的作用已在实验动物的相应发育阶段做了深入研究，在室区，使用GABA和谷氨酸通过缩短细胞周期而使细胞增殖增加，但是，另一方面这些神经递质也减少了室下区祖细胞的增殖率。这种细胞增殖的不同调节可能调整室区和室下区祖细胞对新皮质生成的相对作用，这些可能是CNS正常发育的最重要因素。 近期的实验结果表明，出生后室下区的神经元祖细胞和胶质细胞祖细胞之间存在非突触GABA能的信号传递[6]，神经母细胞中自然发生的去极化导致的非突触方式GABA的释放激活相邻的星形胶质细胞的GABAA受体从而导致后者增殖的减少，GABA和谷氨酸在新生的神经元前体细胞向它们的目的地迁移过程中的作用也已得到证实。在大脑发育成熟的过程中，GABA通过引导新生的胚胎神经元从室区向中心区迁移显示出趋化作用，谷氨酸通过NMDA受体起作用，也可以刺激胚胎中心神经元的迁移。 GABA和谷氨酸在CNS发育中的协同作用主要通过以下事实解释，即由于未成熟神经元中细胞内高浓度的Cl-以及GABAA受体的激活导致这些细胞的去极化，因而，在大脑发育中，不只是谷氨酸，GABA同样也作为一种兴奋性神经递质，它向超极化功能性转化与K+_Cl-共转运体（KCC2）的逐渐表达有关[7]。KCC2可主动的将神经元细胞内的Cl-转运出去， KCC2在啮齿动物出生后早期即可出现，然而至今还没有证据表明人类有此种蛋白的表达。 2、GABA和谷氨酸在神经元分化及神经网络形成中的作用 在啮齿类动物中，神经元分化，突触产生及有功能的网络形成最活跃的阶段是在出生后1～3周（相当于人类妊娠后三个月至出生后最初几年），这一时期相当于感觉传入皮质的起始阶段[8,9]。事实上，有充分证据支持这一观点，即传入突触和网络的活动在神经元树状发育形成中起基础性作用[8]。在神经元发育中树突代表突触接触的基本位置。高度复杂和有组织的树状结构是形成神经元环路的先决条件。虽然，CNS中神经元的特殊形态是由遗传基因决定的，这些内在程序是与细胞外信号协同在树状结构的分化中起作用[10]. 在神经元树状结构形成的早期，GABA和谷氨酸作为非突触因子有促进分化作用，接触GABA可导致树突长度增加，分支增多及突触密度增加，而拮抗GABAA受体，使用GABAA受体的选择性拮抗剂荷包牡丹碱则可产生相反的作用。药理学阻断谷氨酸的NMDA型受体也可显著减少树突的生长率。 在出生后早期神经系统发育的关键时刻突触释放的GABA及谷氨酸是功能性神经元网络形成的调节因子。这个关键时期代表发育的窗口期，在此期间，代表某一特定功能的大脑环路需要接受特定的信息来指导它们持续发育。在兴奋性和抑制性信号间保持精细的平衡是神经网络发育的关键。对神经元活性，除了强烈的药理学干扰外，兴奋性信号和抑制性信号数量上轻微的变化也可显著地改变信息处理过程。 在突