四角蛤蜊醇沉上清液对ccl4致小鼠急性肝损伤保护作用研究.docVIP

四角蛤蜊醇沉上清液对CCl4致小鼠急性肝损伤保护作用研究 陆杰霖，柴尧，贾梦蛟，刘睿，王令充，王欣之，吴皓* （南京中医药大学 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室，江苏 南京210023） 摘 要： 目的：研究四角蛤蜊醇沉上清液对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法：四氯化碳造成急性肝损伤模型，，测定小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST），还原性谷胱甘肽（GSH）活性；测定肝匀浆中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力，对肝组织进行病理学检查。结果：醇沉上清液（MS）高、中、低剂量组具有明显的剂量依赖性降低CCl4致小鼠肝损伤血清ALT，AST，GSH（P0.01），高、中剂量组降低肝均浆中MDA的含量（P0.05），增强SOD的活性（P0.01）。通过病理学切片观察，MS各剂量组能显著改善肝组织的病理变化。结论：MS对CCl4造成的小鼠急性肝损伤具有显著的保护作用。 关键词：四角蛤蜊醇沉上清液；CCl4；保肝作用 ABSTRACT: Objective: We studied effects of ethanol subsiding method from Mactra veneriformis (MS) on carbon tetrachloride (CCl4)-induced liver injury in mice. Methods: Blood tissue samples were collection. Evaluations were made for lipid peroxidation, enzyme activities and biochemical parameters. Pathological histology was also performed. Results: MS pretreatment reduced the serum aspartate aminotransferase (ALT), alanine aminotransferase (AST), and reduced glutathione activities. By contrast, MS pretreatment reduced liver MDA content and increased liver tissue SOD. The CCl4-induced histopathological changes were also reduced by the MS pretreatment. Conclusion: Our results show that MS can be proposed to protect the liver damage induced by CCl4. Key words: ethanol subsiding method from Mactra veneriformis; CCl4; Hepatoproteaction 四角蛤蜊(Mactra venerformis)为软体动物门(Mollusca)，隶属于瓣鳃纲(Lamellibranchia)异齿亚纲(Helterodonta)帘蛤目(Veneroida)蛤蜊科(Mactride)的动物，是一种广泛分布于我国南北各海区的较大型的经济贝类[1]。宋代《嘉祐本草》中记载蛤蜊肉“ 润五脏，止消渴，开胃，解酒毒。主老癖能为寒热者，及妇人血块，宜煮食之。”现代研究表明，四角蛤蜊具有较好的抗氧化活性，其活性较强部位在四角蛤蜊的水提醇沉上清液中[2]。本文以腹腔注射四氯化碳的方法建立小鼠急性肝损伤模型，评价四角蛤蜊水提醇沉上清液的保肝活性。进一步揭示了海洋软体复杂多样的药理活性。 1 材料 1.1 实验原料 四角蛤蜊（江苏省海洋水产研究所提供，批号经江苏省海洋水产研究所万夕和研究员鉴定为蛤蜊科动物四角蛤蜊（Mactra veneriformis Reeve）的新鲜软体部分） 1.2 样品制备 取新鲜四角蛤蜊软体15kg，洗净泥沙，沥干后绞碎，放入多功能提取罐，加3倍量水，每次煮沸40min，煎煮3次，出去滤渣，合并滤液，得到四角蛤蜊总提液。将滤液浓缩至适量，14000rmp离心，取上清液，加入95%乙醇，使乙醇质量分数达到65%，搅匀，静置24h，抽滤，得沉淀和上清液。沉淀去除加适量水复溶后加95%乙醇，使乙醇质量分数达75%，搅匀，静置24h，合并两次上清，加压回收乙醇，得褐色的上清液浸膏，即得四角蛤蜊醇沉上清液。 1.3 试剂与试药 联苯双脂（北京协和药厂，产品批号；四氯化碳（成都市科龙化工试剂厂，批号，时用使用花生油配制成0.1%的花