污染土壤微生物遗传多样性的研究进展.docVIP

研 究 生 课 程 考 试 卷 学号、姓名： 刘建国 年级、专业： 11级 微生物学 培养层次： 硕士 课程名称： 微生物遗传学 授课学时学分： 32学时 2学分 考试成绩： 授课或主讲教师签字： 评语： 评阅人： 年 月 日 污染土壤微生物遗传多样性的研究进展 学号姓名：刘建国 专业：微生物学 摘要：土壤中存在巨大的微生物资源, 不同的土壤系统中又生存着不同的微生物群落, 而微生物的多样性既依赖于生态系统又为生态系统的发展和演化提供不竭的动力。本文主要阐述了近年来对污染土壤的微生物遗传多样性方面的研究状况，并总结了近年来应用于微生物遗传多样性研究中的实验技术。 关键词：污染；土壤微生物；遗传多样性；研究 随着工业化、城市化、农业集约化的快速发展,人们对农业资源的高强度开发利用, 使大量未经处理的固体废弃物、污水向农田转移, 过量的化肥与毒害污染物逐年在土壤中残留, 造成土壤环境发生显性或潜性复合污染[1]。目前，土壤污染已经受到人们越来越多的关注，成为一个世界性问题。土壤污染对生物存在直接威胁，并可通过大气颗粒物、直接接触或食物链等方式危害人类健康[2]。研究表明当土壤重金属达到一定浓度时对生态系统能造成长期的毒害影响，并且对生物参与的土壤生化过程有明显的负面作用[3]。例如，重金属在土壤中很难被降解，一旦污染很难清除，不仅带来严重的土壤环境恶化，更影响到土壤微生物的区系，改变微生物群落，降低生物量，影响其生物活性等方面[4]。因此对污染土壤微生物遗传多样性的研究具有重要的意义。 1.研究状况 遗传多样性是生物多样性的基础和最重要的成分,是生物携带遗传信息的总和，从本质上讲生物多样性源于遗传的多样性，可用来描述种群遗传变异和研究维持变异的机制, 遗传变异可以在形态、细胞和分子水平上体现。微生物遗传多样性在分子水平上体现主要是由于遗传物质的碱基排列顺序的多样性和组成核酸分子的碱基数量的巨大性。此外,DNA复制中出现的碱基或碱基对的变化，双链DNA、单链DNA、双链RNA和单链RNA等多种遗传信息的存在,转导、转化和接合及准性生殖等微生物特有的基因重组现象,使微生物遗传的多样性大大扩展,同时也为微生物遗传变异、系统进化提供了多样化手段，微生物正是通过更换遗传物质才使自身不断的发生变化,从而适应不同的生态环境[5]。 东秀珠（2001）等研究表明，微生物多样性在基因水平上主要表现为基因组大小和基因数目的多样性, 遗传物质化学组成的多样性和某些特异性序列的变异[6]。段学军（2004）等采用现代分子生物学技术，通过对不同浓度镉处理的稻田土壤16S rDNA V3可变区片断进行DGGE指纹图谱分析，结果显示在镉处理初期，不同浓度镉胁迫下的稻田土壤微生物区系的基因条带出现较明显的差别[7]。姚健（2000）等采用RAPD分子遗传标记技术研究了农用化学品不同使用环境下的4种土壤微生物群落DNA序列多样性的变化。结果表明,4种土壤微生物群落DNA序列在其丰富度、多样性指数、均匀度等方面均存在差异，农用化学品的使用会对土壤微生物群落在DNA分子水平上的多样性产生影响，农药污染还会引起土壤微生物DNA序列本身发生变化[8]。张素琴（1994）等采用PCR 技术对环境中 tfd B基因检测结果表明污染程度与该基因存在正相关, 说明质粒是微生物适应环境而进化的结果，其次通过获得诱导酶的能力使微生物能在污染环境中生存。此外, 通过共代谢来转化污染物产生微生物的群体行为[9]。刘云国（2007）等对不同程度锰污染的7个水稻土壤样品进行研究，DGGE结果表明不同程度的锰污染对供试土壤微生物的组成产生了明显的影响，土样微生物群落遗传多样性存在较大差异。锰污染对微生物群落结构和遗传多样性的影响主要是通过影响群落中一部分对锰浓度敏感的种群而实现的[10]。赵祥伟（2005）等对铜、锌、铅、镉不同程度复合污染的4个农田土壤样品通过扩增土壤总DNA中的16SrDNA和DGGE分析，结果表明不同程度的重金属复合污染明显改变了农田土壤的微生物群落遗传多样性,但与多样性的改变不是简单的负相关关系[11]。目前，国内的研究主要集中在重金属污染下土壤微生物遗传多样的研究，对化学品污染下的研究相对较少，另一方面，研究大多集中于土壤污染对微生物遗传多样性的影响，而对其机理和作用机制研究并不多见。 2.技术应用 当前我国在此方面的研