ppt课件-第四章 微生物的营养和培养基.ppt

3、条件适宜 知道了各类微生物生长的aw值，不仅有利于设计它们的培养基，而且对防止食物的霉腐也有重要的意义。 一、选用和设计培养基的原则和方法 一)四个原则 1、目的明确 2、营养协调 3、理化适宜 4、经济节约 二)四种方法 1、生态模拟 2、参阅文献 3、精心设计 4、试验比较 1、目的明确 是指培养基组分应适合微生物的营养特点 首先明确培养基的对象和目的，如培养何菌？获何产物？用于实验室还是大生产用？是进行一般研究还是作精密的生理、生化或遗传学研究？是用于种子培养还是发酵培养？等等。 然后选择合适的微生物，并根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基 不同营养类型的微生物，其对营养物的需求差异很大。 不同类群的微生物，它们所需要的培养基成分也不同。 当对试验菌营养需求特点不清楚的时候，可以采用“生长谱”法进行测定。 2、营养协调 表4-7 2、营养协调 是指营养物质浓度与配比要合适 微生物细胞内各成分间有较稳定的比例。 要素：H2 O C+能源 N源 P、S K、Mg 生长因子 含量: ~10-1 ~10-2 ~10-3 ~10-4 ~10-5 ~10-6 碳氮比(C/N比)：培养基中所含碳原子摩尔数与氮原子的摩尔数之比。 氮源：NH3 CO(NH2)2 NH4NO3 (NH4)CO3 (NH4)2SO4 AA 蛋白质 N%：82 46 35 29.2 21 8~27 ~16 一般而言： 真菌需C/N比较高的培养基，细菌需C/N比较低的培养基 发酵培养基C/N比较高，种子培养基C/N比较低 缺N:用粪便污水或尿素补充；缺P:磷酸氢二钾 3、理化适宜 指培养基的pH值、渗透压、水活度和氧化还原势等物理化学条件较为适宜。 1)pH值： 各大类微生物都有其生长适宜的pH值范围： 细菌：7.0~8.0 　放线菌：7.5~8.5　酵母菌：3.8~6.0 霉菌：4.0~5.8　 藻类： 6.0~7.0　 原生动物： 6.0~8.0 但对某一具体微生物物种而言，其生长的最适pH范围可大大突破上述界限。 3、理化适宜 1)pH值： pH值的调节： pH值的内源调节：通过培养基内在的成分所起的调节。 ①借磷酸缓冲液进行调节 ----调节K2HPO4和KH2PO4两者的浓度比即可获得pH值在6.0~7.6(6.8)之间的一系列稳定的pH值 ②以CaCO3作为“备用碱”进行调节----在产酸的发酵过程加入1~5%的CaCO3 ，但因CaCO3在培养基上有沉淀，可用NaHCO3代替。 pH值的外源调节：按实际需要不断从外界流加酸或碱液来调整培养液pH值的方法。 3、条件适宜 2)渗透压和水活度 ①渗透压： 表示不同浓度的溶液间若被一个半透性薄膜隔开时，稀溶液中的水分子会因水势的推动而透过隔膜流向浓溶液，直至两边水分子进出达到平衡时，由浓溶液中溶质所产生的机械压力，即为它的渗透压，其大小由溶液中所含有的分子或离子的质点数决定。 等渗溶液 适宜微生物生长 高渗溶液 细胞发生质壁分离 低渗溶液 细胞吸水膨胀，直至破裂 电解质离解的分子和离解生成的离子 3、条件适宜 2)渗透压和水活度 ②水活度 在同温同压下，某溶液的蒸气压(P)与纯水蒸气压P0)之比，等于该溶液的百分相对湿度值(ERH)。 水活度(αw)=P/P0=ERH/100 ? 表示溶液的蒸汽压 ?0表示纯水的蒸汽压 水活度的测试方法主要有： 扩散法（康威微量扩散皿) 水活度仪测定法 其他方法 康威皿 原理：样品在康威皿中，在恒温条件下，根据样品在不同的标准饱和溶液中平衡后，质量的增加或者减少，作图，横坐标为水活度，纵坐标为质量变化。 3、条件适宜 微生物生长繁殖的αw值在0.998~0.60之间 一般：0.90-0.98 生长最低αw 嗜盐菌：0.75(约5.5mol/L NaCl) 一般：0.87-0.91 高渗酵母：0.61-0.65(低于饱和蔗糖液) 鲁氏酵母：0.60 一般：0.80-0.87 耐旱菌：0.65-0.75 双孢旱霉：0.60 细菌 酵母菌 霉菌 若干食物的αw 新鲜水果：0.97～0.98 面包：0.86 奶粉：0.2 鲜肉（家畜）：0.97 蔗糖饱和液：0.76 大米、面粉（含水量14%）：0.65 3、条件适宜 3)氧化还原电势(redox poyential) 又称氧化还原电位，以Eh表示。指以氢电极为标准时某氧化还原系统的电极电位值，单位是V或mV。 各种微生物对培养基的氧化还原电势的要求： 好氧微生物：+0.3~+0.4V，(在0.1V以上的环境中均能生