活化部分凝血活酶时间APTT测定.DOCVIP

深圳市沙井人民医院 版本版次：A/01 临床血液作业指导书 生效日期：2005.01.01 第 1 页 ，共 2 页 活化部分凝血活酶时间测定（APTT） 项目名称: 活化部分凝血活酶时间(Activated Partial Thromboplastin Time,APTT) 2.检验目的 2.1手术前的检测 2.2 DIC的协诊 2.3抗凝药物治疗监测 2.4凝血因子检查 2.5循环血液中抗凝物质和一些疾病协诊等 3.检验原理： 3.1检测原理:全自动血凝仪测定,散射光凝固法检测——确定量的血浆样本（50μl）经过一定时间（3min）温育后，加入部分凝血活酶时间反应试剂（50μl），加温1min，加入0.025MCaCl250μl，加温4min,采用波长660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中的浊度变化,从散射光光强度的测定可得凝集曲线，反应物凝固的时间即活化部分凝血活酶时间。 3.2反应方法学溯源:37℃条件下,以鞣花酸激活因子Ⅻ和Ⅺ,以脑磷脂(部分凝血活酶)代替血小板,在Ca2+参与下,观察贫血小板血浆凝固所需时间,即为活化部分凝血活酶时间,是内源凝血系统较敏感和常用的筛选试验. 4.性能参数 4.1重复性:CV≤2% 4.2分析和计算参数:报告单位 秒(S) 4.3样本量:50ul,试剂量:50ul激活剂,50ul CaCl2 4.4检验时间:在最长检验时间之内测出结果,标准设置最长检验时间:190秒 4.5精密度范围:1.3～6.0% 5．原始样品系统: 血浆 6.容器和添加剂类型 容器采用真空负压专用抗凝管,添加剂类型为0.109M枸橼酸钠 7.试剂及配套品 7.1激活剂:Cephaloplastin试剂(Dade Actin Activated Cephaloplastin Reagent) 7.1.1商标:德灵(DADE BEHRING) 7.1.2包装规格:10×2ml 7.1.3货号:B4218-1 7.1.4成分:脑磷脂(从干燥兔脑粉中提取)加入含有缓冲液、稳定剂和防腐剂的1.0×10-4M的鞣花酸溶液 7.1.5使用方法:液体试剂,直接使用 7.1.6储存:未开封试剂2～8℃贮存到说明书上有效期，开盖后2～8℃有效期7天,不能冰冻。未被污染的试剂稳定期是：2～8℃3年、18～25℃1年、37℃2天; 7.2氯化钙溶液(Calcium Chloride Solution) 7.2.1商标:德灵(DADE BEHRING) 7.2.2包装规格:10×15ml 7.2.3货号:ORHO37 7.2.4成分:0.025mol/L的氯化钙溶液 7.2.5使用方法:液体试剂,直接使用. 7.2.6储存:没开盖试剂放2～8℃存放至试剂瓶上有效期.开盖后2～8℃有效期7天. 7.3清洗液(Clean I):用于测定过程中的吸样针冲洗 7.3.1商标:希森美康(Sysmex) 7.3.2包装规格:50ml 7.3.3货号:GSA500A 7.3.4成分:1%次氯酸钠及活性成分 7.3.5使用方法;液体试剂,直接使用 7.3.6储存:没开盖试剂放2～8℃存放至包装有效期,开盖后放于仪器内有效期仅存4小时 7.4校准质控血浆(Ci-Trol) 7.4.1商标: 德灵(DADE BEHRING) 7.4.2货号:Level 1(Normai),291070 10×1ml Level 2(Abnormal),291071 10×1ml Level 3(Abnormal),291072 10×1ml 7.4.3使用方法:1ml蒸馏水溶解置室温15分钟后使用 7.4.4储存:室温:2h, 2～8℃:4h,冷冻分装保存:-20℃2周,-70℃6个月 8.校准程序:仪器的验证和光路系统校正 仪器的验证由生产商、代理商指定工程师和我科共同完成.灯泡大约半年更换一次,光路系统的校正由代理商完成. 9.程序步骤: 9.1标本采集与要求 9.1.1标本采集: 抽取静脉血1.8ml,加入到含0.2ml109mmol/L(1:9)的枸橼酸钠溶液抗凝真空试管中,并轻轻颠倒10次使之充分混匀,不得有凝块、不得形成泡沫,总量不得超过2.0±0.2ml,并在试管上做好标识.采血应避免溶血和脂血,故患者应尽量空腹和避免在输入脂肪乳过程中或其后8小时内采血.采血后2小时内送到检验科,需要运输时应在低温条件下运输.采集标本时宜“一针见血”,以防止组织损伤,外源性凝血因子进入针管,最好不与其它实验一起采集,否则由于标本的分配、分装而使血液停留在针管的时间延长. 9.1.2不合格标本的处理 对