洋葱卵细胞的分离-中国细胞生物学学报.PDFVIP

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2012, 34(11): 1123– 1128 http ://www.cj 技术与方法 洋葱卵细胞的分离 1 1 1 2 1* 陈美灵　于金金　吴晓琛　魏冬梅　田惠桥 1 2 ( 厦门大学生命科学学院, 厦门361005; 台州学院生命科学学院, 临海317000) 摘要 将洋葱的胚珠置于酶液中酶解50~110 min后剥去其珠被, 可清楚地看到珠心中的胚囊 轮廓。用解剖针将珠心从中部横切, 然后挤压其珠孔部位, 卵器细胞从胚珠的切口处逸出。再用显 微操作仪的玻璃针将卵细胞和两个助细胞分开, 达到分离洋葱卵细胞的目的。酶对分离卵细胞具 [0.02% Y23 0.08% (Serva) 0.05% 0.05% 有重要作用, 在最佳的酶液浓度 果胶酶 、 果胶酶 、 纤维素酶和 ] 110 min 1 h 24 10 (41.67%) 半纤维素酶 下酶解胚珠 后, 解剖 可从 个胚珠中分离出 个卵细胞 。随着胚囊 的发育, 两个助细胞的体积出现明显的二形性。洋葱生活卵细胞的分离为开展洋葱离体受精建立 了基础, 也为研究洋葱卵器细胞的发育创造了条件。 关键词 洋葱; 卵细胞; 分离 [17] , 研究助细胞功能中可能具有特殊意义 高等植物卵细胞被胚珠体细胞层层包裹着 胚 。我们开展 , , 珠又位于雌蕊的子房之中 这成为探索高等植物受 了洋葱卵器细胞的分离实验 尝试建立洋葱离体受 , 精调控机制的主要障碍。利用分离的精、卵细胞在 精实验体系的可行性 也为探索洋葱卵器细胞发育 , , , 体外诱导融合 排除了体细胞的干扰 重演受精过程 机理的研究提供了实验基础。 , 使定点追踪合子胚胎的发生变化得以实现 是目前 研究受精机理的有效手段。离体受精的前提之一是 1 材料与方法 1985 , [1] (Allium cepa 分离出卵细胞。 年 胡适宜等 最早从烟草中分 实验材料为