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甘蓝型油菜新型细胞质雄性不育系NCa不育胞质类型的分子
中国农业科学 2005,38(10):1965-1972
Scientia Agricultura Sinica
甘蓝型油菜新型细胞质雄性不育系NCa 不育胞质
类型的分子鉴定
危文亮,王汉中,刘贵华
(中国农业科学院油料作物研究所/ 国家油料作物改良中心/农业部油料作物遗传改良重点实验室,武汉 430062 )
摘要:以4 个限制性内切酶(EcoRI、BamHI、HindIII、PstI)进行酶切、14 个线粒体基因为探针,对NCa
和pol、nap、ogura、tour 等5 个甘蓝型油菜细胞质雄性不育系的不育胞质线粒体 DNA 进行 RFLP 分析。在总计
54 个有效探针/酶组合中,除12 个组合在5 种不育细胞质间没有检测到差异外,其余42 个探针/酶组合在5 个不
育系中均检测到差异。其中, atp1/EcoRI、atp1/HindIII、atp6/Eco RI、atp8/Bam HI、orf139/ Bam HI 等 5 个
探针/酶组合在 5 个不育系的不育胞质间检测到各不相同的条带,从而可以将它们两两完全区分开。RFLP 分析结
果从分子水平上进一步证明了NCa 不育系确实具有与pol、nap、ogura、tour 等不育系不同的的不育胞质,是一
类新的不育胞质类型。这5 个探针/酶组合也可以作为鉴定甘蓝型油菜不育细胞质的分子标记。根据控制pol、nap、
ogura 等不育系的线粒体基因序列和拟南芥线粒体基因组序列设计了22 对引物,对上述5 种甘蓝型油菜不育系的
线粒体DNA 进行了 PCR 分析,没有找到可以将NCa 不育胞质与其它类型不育胞质明显区分开来的引物。
关键词:甘蓝型油菜(Brassica napus L.);细胞质雄性不育;不育胞质类型;PCR;RFLP
Molecular Identification of the Sterile Cytoplasm of NCa of a
Cytoplasmic Male Sterile Line in Rapeseed ( Brassica napus L.)
WEI Wen-liang, WANG Han-zhong, LIU Gui-hua
( The Oil Crops Research Institute, Chinese Academy of Agriculture Sciences / National Center for Oil Crops Improvement /
The Key Laboratory for Genetics and Improvement of Oil Crops, Ministry of Agriculture, Wuhan 430062 )
Abstact: Previous research on the NCa, a cytoplasmic male sterile (CMS) line in Brassica napus, showed that it might hold a
new type of sterile cytoplasm. RFLP analysis of the mitochondrial (mt) DNA of the 5 CMS lines, i.e., NCa, pol, nap, ogura and tour
CMS, combining 14 probes originated from mt genes with 4 endonuclease, such as EcoR I, BamH I, Hind III and Pst I, was
performed and detected that 42 combinations of probe/enzyme out of the total 54 combinations could discover the different bands
among the 5 CMS lines and then distinguish some of
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