石菖蒲含量测定综述.docx

石菖蒲的β-细辛醚的含量测定钟 笑摘要：目的：通过测定石菖蒲中主要成分β-细辛醚的含量，来建立石菖蒲含量标准，控制药品生产中石菖蒲的用量，从而达到生产出合格药品。方法：用HPLC法测定其有效成分β-细辛醚含量。结果：薄层鉴别中，石菖蒲供试品在与对照品相对保留时间相同的位置上，显相同颜色的斑点。HPLC法测得β-细辛醚在0.2μg-1.0μg范围内线性关系良好，以进样量为X，峰面积为Y作回归方程，其回归方程为y=2238667.3x-28014,r=0.9997，平均回收率为100.15%（RSD=1.39%）。结论 该方法简便可行、重复性好，可用于石菖蒲的质量控制。关键词：石菖蒲；β-细辛醚；高效液相色谱；薄层色谱石菖蒲(Acorus tatarinowii schott)系天南星科(Araceae)菖蒲属石菖蒲的干燥根茎，中国药典2010年版将其收载其中。[1]石菖蒲为多年生草本，味辛、苦，性温，归心、肝、肺、脾、胃经，具有健胃祛风、活血止痛、开窍豁痰、醒神益智、消肿、解毒、杀虫之功效。临床上常用于消化不良、热病神昏、癫狂、痰厥、胸腹胀满、胃肠绞痛、痈疖肿痛、跌打损伤等。[2]近年来研究发现，挥发油是石菖蒲镇静、催眠、抗惊厥作用的主要有效部位，[3]而挥发油中主要活性成分是细辛醚系列物，主要有甲基丁香酚、顺式甲基异丁香酚、α-细辛醚、 β-细辛醚等。[4]本人主要从石菖蒲药材中β-细辛醚含量进行研究，具体来说就是通过测定石菖蒲中主要成分β-细辛醚的含量，来建立石菖蒲含量标准，控制药品生产中石菖蒲的用量，从而达到生产出合格药品的标准。由于石菖蒲的含油率随产地不同差异较大，α-细辛醚、β-细辛醚在浙江金华和河南嵩县产石菖蒲中的含量较高，因此在本次研究拟用浙江金华或河南嵩县产的石菖蒲。常用的挥发油含量测定方法为GC-MS联用，虽然GC-MS联用的方法在定性分析方面具有很强的鉴别能力，但应用于定量分析时其选择性，重复性，灵敏度等均与高效液相色谱法有一定差距。因此本次研究拟建立用高效液相色谱测定石菖蒲中β-细辛醚的含量的方法。1.实验材料1.1 仪器岛津高效液相色谱仪 （主要部件：LC-20AD双泵，Sil-20A自动进样系统，SPD-20A检测器，LC solution色谱工作站。）SK250HP型超声波清洗器。（KUDOS）XS105电子分析天平。JFSD-100粉碎机。具塞锥形瓶、容量瓶、移液管、胶头滴管、漏斗、滤纸、玻璃棒、量筒、烧杯、称量纸、培养皿。1.2试剂与药材甲醇、蒸馏水、β-细辛醚对照品、石菖蒲药材。2.方法与结果2.1石菖蒲的鉴定2.1.1来源 石菖蒲为天南星科石菖蒲（Acorus tatarinowii schott）的干燥根茎。2.1.2薄层鉴别 取石菖蒲药材，经粉碎机粉碎并研磨成粉，过筛，取石菖蒲粉末（中粉）0.5g，加乙酸乙酯10ml，浸泡1小时，低温超声处理（功率250w ，频率250kHz）20min,滤过，滤液作为供试品溶液；取β-细辛醚对照品用乙酸乙酯配置成1ml含2mg的溶液作为对照品溶液。取上述试液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚：乙酸乙酯（12:1）为展开剂，上行展开，待展开至前沿线时，取出薄层板，晾干，然后喷以5%磷钼酸乙醇溶液，吹热风至斑点显色清晰。结果 薄层鉴别中，石菖蒲供试品与β-细辛醚对照品相对位移时间相同的位置上，均成深蓝绿色斑点。2.2 HPLC法测定石菖蒲中β-细辛醚含量2.2.1色谱条件色谱柱：Phenomenonex C18(4.6mm×250mm,5μm)；流动相：水：甲醇(37:63)；检测波长253nm；流速：1ml/min；进样量：10μL；按上述色谱条件，理论塔板数按β-细辛醚计算应不低于4000，分离度均大于1.5。[5]2.2.2石菖蒲药材供试品溶液的制备 将石菖蒲药材经粉碎机粉碎，将石菖蒲粉末过筛，取中粉约0.05g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，摇匀，称定重量，浸泡2小时，超声处理（功率250w ，频率250kHz）20min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，滤过，取适量续滤液用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液即为供试品溶液。2.2.3对照品溶液的制备精密称取β-细辛醚对照品适量，用甲醇配置成每1ml甲醇含β-细辛醚0.05mg的对照品溶液。2.2.4 线性关系考察分别精密吸取上述对照品溶液2μL、4μL、6μL、8μL、10μL进行色谱测定，按2.2.1色谱条件测定峰面积，以峰面积为Y对进样量X进行线性回归。编号 进样量/μl β-细辛醚/μg 峰面积 1 2 0.2408890240.4