酶抑制剂和激活剂.pptVIP

酶的抑制剂与激活剂;;二.基本原理 酶分子与配体结合后，可以改变酶的活性。使酶活性降低乃至完全丧失活性的配体，称为酶的抑制剂；能启动和（或）增强酶的活性，称为酶的激活剂。研究酶的抑制和激活作用，具有重要的实用价值。 抑制剂或激活剂的作用部位，主要是酶的活性中心的必要基团或直接影响酶的结构残基所引起的效应。;; Folin-酚法测碱性蛋白酶酶活原理;三.器材和用具 1.恒温水浴锅，试管，722紫外可见分光光度计，移液枪，EP管，试管架。 2.试剂：20mM/L氯化钙， 20mM/L硝酸银， 20mM/L硫酸铜， 20mM/L氯化汞， 20mM/L氯化镁，0.6％洗衣粉， 0.4 mol/L 碳酸钠， 2％酪蛋白，枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶(稀释2000倍)，福林-酚(市售福林-酚试剂加水稀释1倍，约为1 mol/L )， 0.5M/L氢氧化钠，pH10硼砂缓冲液，pH7磷酸缓冲液， 10% TCA。;;; 2．洗衣粉对酶活力的影响： (1)分别在pH 7.0和pH 10.0酶液中加入洗衣粉(反应液终浓度为0.03%)。 (2)混合液和pH7原酶液、 pH7空白(共4支)于25℃下放置20 min。 (3)测酶活力，并以原酶活力为100，算出相对酶活。 ;五.注意事项 1.实验中，以先加TCA的酶液为空白，以原酶液试管为 标准液，对其操作应与实验试管同步一致。 2.由于分光光度计比较精密，所以往试管中加药品的 时候要尽量做到准确。 3.拿比色皿是要拿它的毛面，不可以用手接触它的光滑 面；擦拭比色皿要顺着一个方向擦。;; 表1 金属离子对酶活力的影响 ;表2 洗衣粉对酶活力的影响 ;八.问题与思考 1.根据你的实验结果，上述实验因子哪些是枯草杆菌碱性蛋白酶的抑制剂，哪些是激活剂？ 2.用何方法可以解除或避免金属离子对酶的抑制作用？ 3.查阅文献，试对你的实验结果作出机理上的可能解释。