采用增强拉曼检测技术对牛奶中三聚氰胺的检测.docx

拉曼检测技术对牛奶中三聚氰胺的检测姓名：马超学号：1130060095前言1.1 拉曼光谱分析技术简介拉曼光谱分析技术是以拉曼效应为基础建立起来的分子结构表征技术,它与红外光谱相同,其信号来源于分子的振动和转动[1],是分子极化率变化诱导产生的,它的谱线强度取决于相应的简正振动过程中极化率变化的大小[2],所提供的结构信息是关于分子内部各种简正振动频率及有关振动能级的情况,从而可以用来鉴定分子中存在的官能团。拉曼效应普遍存在于一切分子中,拉曼散射光谱不依赖复杂严格的样品前处理过程,极大地优化了检测流程,降低了检测成本,其最突出的优点在于无损伤探测,尤其适合对那些稀有或珍贵的样品进行分析,如名家字画、古籍文物等,甚至可以用拉曼光谱检测活体中的生物物质[3]。1974年FleischmannM[4]发现的表面增强拉曼散射使痕量物质检测成为可能。表面增强拉曼光谱技术(SERS)利用痕量分子吸附于Cu、Ag、Au等金属溶胶和电极表面,其拉曼光谱信号可增强104~106 [5],克服了常规拉曼光谱法灵敏度低的缺点。SERS技术作为一种新的表面测试技术,可以在分子水平上研究材料分子的结构信息[6],如银纳米粒子,银胶体粒子上的联喹啉等[7]。1.2 三聚氰胺的定义三聚氰胺(Melamine)是一种重要的氮杂环有机化工原料,是重要的尿素后加工产品。三聚氰胺简称三胺,学名三氨三嗪,别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚氰酰胺[8]。它是白色单斜晶体,具有D3h对称性至可以用拉曼光谱检测活体中的生物物质1974FleischmannM[4]发现的表面增强拉曼散射使痕量物质检测成为可能。表面增强拉曼光谱技术(SERS)利用痕量分子吸附于Cu、Ag、Au等金属溶胶和电极表面,其拉曼光谱信号可增强104~106 [5],克服了常规拉曼光谱法灵敏度低的缺点。SERS技术作为一种新的表面测试技术,可以在分子水平上研究材料分子的结构信息[6],如银纳米粒子,银胶体粒子上的联喹啉等。113 三聚氰胺的用途三聚氰胺是一种用途广泛的有机化工中间产物,最主要的用途是作为生产三聚氰胺/甲醛树脂(MF)的原料。三聚氰胺还可以作阻燃剂、减水剂、甲醛清洁剂等。该树脂硬度比脲醛树脂高,不易燃,耐水、耐热、耐老化、耐电弧、耐化学腐蚀,有良好的绝缘性能、光泽度和机械强度,广泛运用于木材、塑料、涂料、造纸、纺织、皮革、电气、医药等行业1.4 牛奶中加入三聚氰胺的目的食品工业上普遍采用、被定为国家标准的检测生鲜奶蛋白质含量的方法是凯氏定氮法。凯氏定氮法并不是直接检测蛋白质含量,而是通过测氮含量来推算蛋白质含量。三聚氰胺含氮量高达66%左右,将其混入掺水或劣质生鲜奶中,就可以在检测中造成蛋白质含量达标的假象。2 材料与方法2.1 仪器便携式拉曼检测仪RamTracer-200ò型(OptoTrace (Bei-jing) Technologies, Inc1);样品瓶32@1116 mm(KG); PCX固相萃取柱(Agela, 60 mg /3 ml)。2.2 试剂乙腈(色谱纯),甲醇(色谱纯), 5%氨化甲醇(分析纯),1 mol/L盐酸(分析纯),去离子水;表面增强试剂:OTR202试剂(OptoTrace (Beijing) Technologies, Inc1);OTR103试剂(Op-toTrace (Beijing) Technologies, Inc1)。2.3 样品袋装纯牛奶,三聚氰胺纯品粉末(分析纯)。2.4 实验步骤梯度浓度三聚氰胺牛奶制备 (1)称取三聚氰胺纯品粉末011 g,去离子水溶解,定容至100 m,l制得1000 mg /L三聚氰胺储备液。(2)以1000 mg /L三聚氰胺储备液为母液进行梯度稀释,稀释浓度依次为500、100、50、25、20、10、5 mg /L,取10 mg /L三聚氰胺溶液备测。(3)取浓度为50、25、20、5 mg /L三聚氰胺溶液各1 m,l用纯牛奶定容至10 m,l制得浓度为5、215、2、015 mg /L的三聚氰胺牛奶。21412 样品前处理取一115 ml塑料离心管,加入017 ml上述梯度浓度三聚氰胺牛奶样品,与乙腈1: 1(v /v)混合,再加入01005 ml 1 mol/L盐酸,振荡1 min,离心2 min(14000 rpm),取上清。依次取1 ml去离子水, 015 ml乙腈,1 ml上清样品, 015 ml甲醇过PCX柱;再取018 ml5%氨化甲醇过柱,前两滴滤液除去,收集剩余滤液备测。21413 检测流程 (1)加样流程:向样品瓶中依次加入015 mlOTR202试剂、011 ml过柱滤液、011 mlOTR103试剂,摇匀。(2)系统参数:激光波长785 nm,激光功率200 mW; In-egrati