食醋和酱油中苯甲酸钠和山梨酸钾含量的测定.doc

食醋和酱油中苯甲酸钠和山梨酸钾含量的测定 专业：食品科学与工程教育 姓名：蒋翠莲 学号指导老师：白绮 摘要:[目的]用高效液相色谱法测酱油和食醋中山梨酸钾和苯甲酸钠的含量。【方法】采用RP-HPLC法以C-18不锈钢柱 （150mm）为色谱柱；流动相：甲醇：乙酸铵溶液（0.02mol/L）=5:95；柱温30℃；流速1.0mol/min ；检测波长230nm；进样量(标准进样量：2.5 ，5 ，7.5 ，10 ，15 ,20ul；样品进样量:5 ul)。【结果】酱油中的山梨酸钾含浓度为0.069mg/ml；苯甲酸钠为0.0146mg/ml；醋中的山梨酸钾为0.00141mg/ml苯甲酸钠为0.00155mg/ml。结论：高效液相色谱法具有高速 、高效 、高灵敏度的优点所以数据准确用外标法计算结果操作简单计算方便得出样品中苯甲酸钠的含量。 关键词：高效液相色谱法 苯甲酸钠 山梨酸钾 前言：苯甲酸钠，化学式：C6H5O2Na，是苯甲酸的钠盐，苯甲酸钠是很常用的防腐剂，有防止变质，延长保质期的效果。山梨酸钾别名2,4-己二烯酸钾，是山梨酸的钾盐，也是防腐剂。本实验采用RP-HPLC法对酱油和醋中的苯甲酸钠和山梨酸钾的含量测定，方法简便，快速，实用于苯甲酸钠和山梨酸钾的定量分析。1 实验部分 1.1实验目的 了解高效液相色谱仪基本结构和使用原理，操作过程。学习高效液相色谱保留值定性方法和外标法的标准曲线测定方法。学习RP-HPLC法对食品中苯甲酸钠和山梨酸钾的含量的测定方法。 1.2 仪器与试剂 LC-6A/10A 高效液相色谱处理系统：由日本岛津公司提供；Milli-Q超纯水处理器；HS6150D型超声波处理器；2XZ-1型旋片真空泵，由浙江黄岩求精真空泵厂制造。 甲醇：HPLC，500ml，由Guangdong Ghuanghua Sol-Techco，Led提供；氨水：AR，500ml，由成都市科龙化工厂提供；碳酸氢钠（优级纯）纯度99.5%，500g 由成都市科龙化工厂提供；苯甲酸钠：AR 纯度99.5%，250g 由成都科龙化工厂提供；山梨酸钾：AR 纯度98.0%，由成都市科隆化工厂提供。 1.3 仪器工作条件 色谱柱：C-18不锈钢柱 150mm；流动相：甲醇：乙酸铵溶液（0.02mol/L）=5:95；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；波长：230nm;进样量：2.5-5.0ul 1.4 试验方法 量取10ml的待测样品，放入小烧杯中，温热，搅拌去除二氧化碳。加（1+1）的氨水调价PH值约为7,加水定容至50ml。使用前取1-2ml于小离心管中12000rpm离心，上清液经滤膜（0.45）过滤后进样，准备上机分析。 1.5实验过程及操作 开泵20分钟，开检测器，进样分析，进样顺序，先洗针，用有机水洗6次以上，再用水洗6次以上，吸样时针内不可有气泡，Load位置注入，Inject进样，保持针不动一分钟，取标准样量分别为，2.5,5,7.5,10,15ul，酱油、醋各5ul，一次加入高效液相色谱仪，记录色谱图，分析实验数据。操作过后关检测器，冲洗仪器，关输液泵。 2 结果与讨论 2.1 工作曲线的制作 2.1.1标准溶液储备液的的配制 苯甲酸钠标准储备溶液：准确称取0.1000g苯甲酸钠，加碳酸氢钠溶液(20个/L)5ml,加热溶解，移入100ml容量瓶中，加水定容至刻度，此溶液中苯甲酸钠含量为1mg/ml，作为储备溶液。 山梨酸钾标准储备溶液：准确称量0.1000g山梨酸钾，加碳酸氢钠溶液（20g、L）Ml，加热溶解移入100ml容量瓶中，加水定容，此溶液中山梨酸钾含量1mg/ml，作为储备溶液。 苯甲酸钠山梨酸钾混合标准使用溶液：取苯甲酸钠，山梨酸钾标准储备溶液各1.0ml放入100ml容量瓶中加水定容，此溶液中含苯甲酸钠和山梨酸钾各0.01mg/ml,经滤膜过滤。 2.1.2试验数据及处理 2.1.2.1 试验数据 表一 混标2.5ul中苯甲酸钠和山梨酸钾的数据 名称 保留时间 峰高 峰面积 苯甲酸钠 山梨酸钾 6.515 9.215 7201.064 8086.229 79549.8 118600.6 图一混标2.5ul中苯甲酸钠和山梨酸钾的色谱图 表二混标5.0ul中苯甲酸钠和山梨酸钾的数据 名称 保留时间 峰高 峰面积 苯甲酸钠 山梨酸钾 6.456 9.148 13731.67 15559.62 153639.8 229940.