(09级兽医27学时)实验四 细菌染色(3学时).ppt

实验四 细菌的染色;目的：1、了解细菌革兰染色的原理 掌握革兰染色方法 2、 学习掌握芽孢染色方法内容： 1、涂片 2、革兰染色、芽孢染色;细菌染色的目的意义：;染色剂分类：; 涂片染色程序：涂片 自然干燥 固定 染色干燥 镜检;细菌涂片示例： ;革兰染色可将所有的细菌分为两大类，蓝色的革兰阳性菌和红色的革兰阴性菌。是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法。;革兰染色步骤为：紫、碘、酒、红四步。1、草酸铵结晶紫染色1-2 min（碱性染料着染)，水洗； 2、革兰氏碘液染1-3 min（媒染剂媒染)，水 洗； 3、酒精脱色30s左右（脱色剂)，水洗； 4、稀释的石炭酸复红30s— 1min（复染），水洗。  干燥 ， 镜检。 ;笑镀汤灼捅嵌园邮稍酗剑丈饭椰擎咸撇衫矿花比锣抒舌黑油稼搓垫甘买选(09级兽医27学时)实验四 细菌的染色(3学时)(09级兽医27学时)实验四 细菌的染色(3学时);革兰阳性菌：细胞壁肽聚糖层厚，交联而成的肽聚糖网状结构致密，经乙醇处理发生脱水作用，使孔径缩小，通透性降低，结晶紫与碘形成的大分子复合物保留在细胞内而不被脱色，结果使细胞呈现紫色。革兰阴性菌：细胞壁肽聚糖层薄，网状结构交联少，类脂含量较高， 经乙醇处理后，类脂被溶解，细胞壁孔径变大，通透性增加，结晶紫与碘的复合物被溶出细胞壁，因而细菌细胞被脱色，再经石炭酸复红复染后细胞呈红色。 ;革兰染色步骤;革兰染色时注意事项：1、要用幼龄培养物作革兰染色；2、涂片不宜太厚，以免脱色不完全造成假阳性;三删洒废霄迄慨桑拟蒙宇虏颁搪弛蝎妹台时菜铅槛跺抒绝竟玫侩攀减割坎(09级兽医27学时)实验四 细菌的染色(3学时)(09级兽医27学时)实验四 细菌的染色(3学时); 特殊染色法 是对细菌特殊结构进行染色的方法。包括芽胞染色、荚膜染色、鞭毛染色等。;芽胞染色原理：细菌的芽孢壁比营养体的细胞壁结构复杂而且致密，透性低，着色和脱色都比营养体细胞困难。;方法：采用碱性染料微加热着染或延长染色时间，使营养体（菌体）和芽胞都着色后，再脱去营养体细胞的颜色而保留芽胞的颜色，再用其他颜色的染液着染营养体方法，并可在显微镜下区别。;孔雀石绿—沙黄法染色步骤; 孔雀石绿;芽胞染色结果是：营养体染成红色，芽孢染成绿色。;思考题1、革兰染色的关键步骤是什么？2、当你对未知菌进行革兰染色时，怎样保 证操作正确，结果可靠？3、进行革兰染色时注意那些事项？ 4、怎样使芽孢着色？5、什么是染料，分几种？细菌染色常用哪几种？;作业：原理、方法、结果、分析讨论及绘图、思考题。 绘图：绘出用革兰氏染色法染出的细菌形态图要求：视野要圆；细菌的大小要合理；并写出菌名及放大倍数；用铅笔。标出染的细菌种类及颜色。;10х100;END