转染白细胞介素-12基因的脐带间充质干细胞对胃腺癌细胞的影响.pdfVIP

广东医学 2015年 7月 第 36卷第 l3期 GuangdongMedicalJournalJu1．2015，Vo1．36，No．13 · l987 · 转染 白细胞介素 一12基因的脐带间充质干细胞 对 胃腺癌细胞的影响：l： 王久香 ，康柏会 ，司宁宁 ，赵芳菲 ，刘晓智 河北省滦平县中医院内科 (068250)；天津市第五中心医院中心实验室(300450) 摘【要】 目的 探讨转染白细胞介素一12(IL一12)基因的脐带间充质干细胞(UCMSCs)对胃腺癌细胞的影 响。方法 原代分离培养和鉴定人UCMSCs；利用重组构建的IL一12和绿色荧光蛋 白(GFP)融合表达的慢病毒载 体 (Lv—IL一12一GFP)感染UCMSCs，酶联免疫法(ELISA)检测细胞 中IL一12的表达。用转染了LV—IL一12一 GFP的UCMSCs与胃腺癌细胞 SGC一7901共培养，Transwe11双室培养体系检测 胃腺癌细胞SGC一7901的侵袭能 力，原位细胞凋亡方法检测 胃腺癌细胞SGC一7901的凋亡情况，Cylinder方法检测48h后转染 了LV—IL一12一 GFP的UCMSCs向胃腺癌细胞SGC一7901的迁移能力。结果 成功分离得到 UCMSCs；ELISA结果显示，经 IL一 12基因转染的UCMSCs可稳定表达持续高水平的IL一12；Transwell结果显示，与转染了LV—IL一12一GFP的UC— MSCs共培养的胃腺癌细胞 SGC一7901的侵袭能力明显下降(P0．05)，凋亡率明显增加 (P0．05)；Cylinder柱 结果显示，转染了LV—IL一12一GFP的UCMSCs向胃腺癌细胞 SGC一7901的定向迁移能力明显下降(P0．05)。 结论 UCMSCs可作为 IL一12基因载体靶向追踪 胃腺癌细胞 ，发挥肿瘤治疗作用。 【关键词】 胃癌；间充质干细胞；基因治疗；白细胞介素一12 Effectsofumbilicalcordmesenchymalstem cellstransfectedwithinterleukin一12geneongastriccarcinomacells． ⅣG —xiang 。 ⅣGBai一 ，SINing—ning，z 0Fang—fei，，J，Xiao—ah． DepartmentofInternal Medicine，HebeiProvinceLuanpingCountryHospitalofTraditionalChineseInternalMedicine，Luanping068250，China Correspondingauthor：LIUXiao一 A【bstract】 0bjective Toinvestigatetheeffectsofumbilicalcordmesenchymalstemcells(UCMSCs)transfected withinterleukin一12 (IL一12)geneongastriccarcinomacells．Methods TheisolatedhumanizedUCMSCswerecul- turedandidentified．UCMSCswereinfectedbythelentiviralvectorfLV—IL一12一GFP)harboringtheIL一12andgreen fluorescenceprotein(GFP)genes．TheexpressionlevelofIL一12wasmeasuredbyenzyme—linkedimmunosorbentas— says(ELISA)．GastriccarcinomacelllineSGC一7901cellswereco—cuhuredwithUCMSCstransfectedwithLV—IL一 12一GFP．TheinvasionabilityofSGC一7901wasmonitoredbythetranswelldualchambercuhnresystem ．andtheapop— tosisofSGC一7901wasdetectedbytheinsitumethod．ThemigrationabilityofUCMSCstransfectedwithLV —IL一 12一 GFPtowradsSGC一7901wasmonitoredbyCylinder48hourslater．Results UCMSCsweresuccessfully isolated．The EUSA resultsshow