重组PBP2a转肽酶区蛋白核酸适配体的筛选及鉴定.pdfVIP

重庆医学2016年 6月第 45卷第 17期 2385 · 技术与方法 · doi：10．3969／j．issn2016．17．027 重组 PBP2a转肽酶区蛋 白核酸适配体的筛选及鉴定 唐晓华 ，杨卫琴 ，黄结贞 ，黄建琼 (1．广州医科大学附属第三医院检验科 510150；2．广州医科大学金域检验学院 51O182) [摘要] 目的 筛选和鉴定重组青霉素结合蛋 白2a(PBP2a)转肽酶区蛋 白的核酸适配体。方法 利用指数富集的配体系统 进化技术(SELEX)，以重组PBP2a转肽酶区蛋 白为靶标，从单链DNA文库中筛选能与之特异性结合的核酸适配体。筛选产物克 隆测序后，对其进行结构分析和特性鉴定。结果 经过 1l轮筛选，单链DNA文库与靶标蛋 白的亲和力趋向稳定，将第8、1O轮筛 选产物克隆测序 ，对获得 的4O个适配体进行分析 ，一级结构分析显示 4O个适配体并无共 同的保守序列，二级结构预测分析表 明， 其可分为 3个家族 。其 中13号适配体与重组 PBP2a蛋