长沙某医院ESBLs检测回顾性调查.docVIP

长沙某医院ESBLs检测回顾性调查【中图分类号】R96 【文献标识码】A 【文章编号】1672－3783(2012)07－0406－01 【摘要】：为了解长沙某医院培养病原菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的产生情况，本文采用双纸片扩散法对临床分离的1109株大肠埃希菌和447株肺炎克雷伯菌进行ESBLs筛选。得出该医院培养的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率处于国内中间水平，对临床分离的肠杆菌科细菌进行ESBLs检测是非常必要的，在首选头孢类抗生素的同时，要考虑产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的可能性。 【关键词】： 超广谱β-内酰胺酶；大肠埃希菌；肺炎克雷伯菌 一 前 言 近年来，由于ESBLs的广泛应用及不合理使用，使耐药菌株迅速增加；ESBLs可通过多种形式进行耐药性的扩散，所以积极开展ESBLs的检测，对临床抗菌治疗有着极其重要的意义。 二、 材料和方法 2.1 材料 2.1.1 菌株来源 1556株菌株自长沙市一医院2007年11月～2010年11月门诊及住院病人分离，标本来源为临床病人的痰、尿、血等；其中大肠埃希菌1109株(2007年200株、2008年250株、2009年376株、2010年283株)，肺炎克雷伯菌447株(2007年70株、2008年 82株、2009年126株、2010年169株)。 2.1.2 标准菌株 大肠埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603，购自中国药品生物制品鉴定所。 2.1.3 药敏纸片及培养基 药敏纸片及MH琼脂均购于Oxoid公司。 2.2 方法 2.2.1 细菌鉴定 对临床送检的标本接血琼脂平板，35 ℃培养18～24 h后进行鉴定。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922及肺炎克雷伯菌ATCC700603。 2.2.2 ESBLs检测 2.2.2.1 初步筛选试验 取MH琼脂培养基接种临床分离纯化菌株，按NCCLS推荐的纸片扩散ESBLs初筛法进行初筛，抑菌环直径以CAZ（头孢他啶）≤22 mm、CTX（头孢噻肟）≤27 mm、AZT（氨曲南）≤27 mm、CRO（头孢曲松）≤25 mm为ESBLs可疑菌株，大肠埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603，作阴性对照和质控菌株。 2.2.2.2 确证试验： 参照NCCLS的表型确证试验：采用头孢他啶、头孢他啶与克拉维酸，头孢噻肟、头孢噻肟与克拉维酸双纸片扩散法，分别测定两种纸片单独及加克拉维酸抑菌环直径，加克拉维酸与不加克拉维酸直径相差≥5 mm即可确认产ESBLs。 三、 结果 筛选菌株的ESBLs检出情况如下。两菌ESBLs的总检出率为23.7 %，其中大肠埃希菌为21.8 %，肺炎克雷伯菌为28.4 %。 2007～2010年，不同年度两菌ESBLs总检出率分别为5.9 %、17.8 %、27.9 %、34.1 %。经x2检验，从2007～2010年中，不同年度大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的总检出率差异有显著性（P＜0.05，x201-02=19.16，x202-03=11.26，x203-04=4.26）。2007～2010年，大肠埃希菌ESBLs检出率分别为4 %、16.8 %、26.1 %、33.2 %，肺炎克雷伯菌分别为11.4 %、20.7 %、33.3 %、35.5 %；不同年度中，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs的阳性率呈逐年上升的趋势。 确证试验中，两组底物（CAZ、CTX）检出ESBLs的情况如下，头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸检测出ESBLs的总阳性率为8.9 %，头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸检测出ESBLs的总阳性率为23.1 %。经x2检验，两组不同底物检出率之间存在显著性差异（P＜0.01，x2CAZ-CTX=116.95）。2007年～2010年，以头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸为底物检测出ESBLs的阳性率分别为1.9 %、6.6 %、11.3 %、11.9 %；以头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸为底物检测出ESBLs的阳性率分别为5.2 %、16.9 %、29.5 %、30.8 %；两种不同底物产ESBLs的检出率呈逐年上升的趋势。各年中，以头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸为底物检测出ESBLs的阳性率均高于以头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸为底物检测出ESBLs的阳性率。因此，临床上在首选头孢类抗生素的同时，要考虑产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的可能性。 四、 结论 （1） 2007～2010年，不同年度大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs总检出率分别为5.9 %、17.8 %、27.9 %、34.1 %。 （2） 以头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸为底物