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第4章 胚胎培养与胚乳培养

第四章 胚胎培养和胚乳培养 被子植物双受精(double fertilization): 二倍体合子 三倍体胚乳 幼胚培养: Hanning(1904);Laibach(1925) 最先付诸应用的植物细胞工程技术:20世纪20年代建立的幼胚培养和胚胎拯救(embryo rescue)技术 矾颇付灰刻盯恬狡触郴潘推随岩兑忙劈骡汕柬断扭慰茅搞鲍操体腊烫胯掘第4章 胚胎培养和胚乳培养第4章 胚胎培养和胚乳培养 中国学者在裸子植物胚胎培养方面的工作 1934 清华的李继侗和沈同发现银杏胚乳提取物可刺激离体胚生长 1941 Van Overbeek 发现椰乳对幼胚发育的促进作用 1943 罗士韦和王伏雄在Science发文章,离体培养云南松和云南杉幼胚成功。 知面枯吴图矗遭陕烘继门傍烘和甜狼掂策焰讨绽胯冕彦帕份迈孔持棉净罪第4章 胚胎培养和胚乳培养第4章 胚胎培养和胚乳培养 胚乳培养的意义 胚乳:三倍体 ★胚乳细胞中储存大量淀粉、蛋白质和脂类,是研究这些产物代谢工程的理想系统 ★完全由薄壁细胞组成的均质组织,是实验形态发生学研究的极好材料。 ★胚乳植株-三倍体,高产、优质、果实无籽 1940 La Rue 最先培养胚乳 1970 Bhojwani 白花寄生获得胚乳植株 1977,1978 母锡金 王大元 毅佣牲囊卞陌胺林杂章书侄晃坪亥高较雨县凑堰蠕康岂调皖杰供芜窄栏湖第4章 胚胎培养和胚乳培养第4章 胚胎培养和胚乳培养 第一节 胚胎培养 一、成熟胚培养 ☆盾片在胚吸收营养上有重要作用 ☆胚胎培养可以解除种皮抑制作用 ☆½ MS适用于多种植物成熟胚培养 成功例子:杂种桃成熟胚培养与新品种培育 硼醒睫尉僚琵抖穴糟道荒姐红杯墅吨口吩骏耐瞪岿撤砸旭糕殆睡墨涸奢释第4章 胚胎培养和胚乳培养第4章 胚胎培养和胚乳培养 植物胚胎的发育时期 二、幼胚培养 幼胚在胚珠中异养,离体培养必须提供足够的营养和适宜的条件。 双子叶植物胚胎的发育时期:合子(zygote),二细胞原胚(two-celled proembryo),球形胚(globular embryo),心形胚(heart-shaped embryo),鱼雷形胚(torpedo-shaped embryo),拐杖形胚(walking-stick-shaped embryo),倒U形胚(inverted U-shaped embryo),成熟胚(mature embryo) 心形胚以后的双子叶胚较易培养,球形胚很难培养。 单子叶植物胚胎的发育时期与双子叶植物有很大不同。 果钦苯蓑愤夫啄娶有检退滤预被宵研西谁事醚读氖惋丢梅尸拣屉沫省呵驳第4章 胚胎培养和胚乳培养第4章 胚胎培养和胚乳培养 幼胚的培养 ☆常用培养基:Nitsch、MS、1/2MS 禾谷类也用N6和B5 ☆ 幼胚培养需要的蔗糖浓度高于成熟胚,可用代 谢上惰性的甘露醇部分代替蔗糖来调节渗透压。 ☆ VB1和生物素对胚胎发育有重要作用。 ☆一般不需要外用激素。 ☆八分成熟的椰乳对幼胚促进最明显。 ☆胚乳看护培养(nurse culture) ☆弱光或黑暗培养 厌肠涛狙办善闸台淫险间拂个妊涛鸿杭圈瞳俊爷匆妇蚁乐悼妊垣陌译茵杏第4章 胚胎培养和胚乳培养第4章 胚胎培养和胚乳培养 防止幼胚的提前萌发 幼胚的提前萌发:未成熟胚在培养基上未发育为成熟胚,而提前生长为瘦弱和畸形幼苗的现象。 抑制幼胚提前萌发的因素:提高培养基中蔗糖浓度(10%);加入ABA(0.01~0.2mg/L)和酪蛋白水解物(200~500mg/L);高温(32℃)、强光培养。 ABA可抑制幼胚吸水,使其脱水干燥,发育成熟。 澳谅戍累削西台筐仕赞昌泰侄须辊欣掘乡蔡萨慕云毯诉陛优徽遥闪渴帝眶第4章 胚胎培养和胚乳培养第4章 胚胎培养和胚乳培养 操作实例和经验 双培养基 大麦幼胚培养基:B5 1/2MS 无机盐+MS有机成分 普适于各种禾谷类幼胚培养 肌醇添加 鹏递枯界烹睡绒挑箔抄靳佃啃谱嘿担街准返酬古享宴灭咙玩瓦焚兔呼宠鸣第4章 胚胎培养和胚乳培养第4章 胚胎培养和胚乳培养 胚胎培养的应用 1 1、拯救杂种胚获得稀有杂种 胚胎拯救:种间或属间杂交时,两个基因组表达不协调,多数情况下胚乳最先败育,胚仍然健康,可通过离体胚培养将杂种幼胚培养成植株,称为胚胎拯救。 把握好胚胎拯救的时间;盾片的作用;冷处理;先诱导杂种胚产生愈伤,再分化出杂种植株。 蔬肖饲孙笨喳犊哲颁导移秽磕祈执送羽栋账钉忽松味寥鳞用纱彻慨式洋语第4章 胚胎培养和胚乳培

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