无载体固定化细胞的研究进展.pdfVIP

《生物工程进展》2000 ,Vol . 20 ,No . 2 无载体固定化细胞的研究进展 白凤武 (大连理工大学生化工程研究所 ,大连 　1160 12) 摘要 　以无载体固定化酵母细胞酒精连续发酵的成功工业化应用为实例 ,并与通常的载体固定化 细胞技术比较 ,阐述了无载体固定化细胞技术的优缺点 ,系统提出了无载体固定化细胞技术的概 念 ,进而对无载体固定化细胞技术在其它微生物发酵和动植物细胞培养过程的应用前景进行了展 望 。 ( ) 关键词 　无载体固定化细胞 　连续发酵 培养 　　固定化的概念最早是在酶工程领域提出来的 , ①在生理方面 ,载体材料有时会对细胞产生比 利用各种方法将水溶性的酶与惰性的载体材料相结 较大的生理毒性 ,对于比较脆弱的动物细胞来说 ,甚 合形成固相酶 ,可以使价格昂贵的水溶性酶重复使 至会导致细胞死亡 , 因而影响 目标代谢产物的生物 用 。但是由于酶是蛋白质 ,它的催化活性与它的空 合成 。 间结构密切相关 ,在很多情况下固相酶的催化活性 ②在生态方面 ,载体材料使细胞或小细胞群体 都很低 , 以固定化氨基酰化酶为例 ,选择比较好的载 相互分隔 ,容易形成不利于细胞之间彼此协调的环 体材料和固定化方法 ,其活性一般也仅为游离酶的 境 ,影响代谢产物的生物合成 ,这对于动植物细胞培 50～60 %[ 1 ] 。由于许多酶都来 自胞内,胞内环境可 养过程来说显得比较突出。 以使酶保持适宜的空间构型 , 因此人们提出了固定 ③在工艺方面 ,载体固定化细胞的大规模制备 化细胞的概念 。1959 年 Hattori 和 Furusaka 首次将 过程复杂 ,容易引起杂菌污染 。 大肠杆菌 E . col i 吸附在树脂上实现细胞固定化[2 ] , ④在工程方面 ,一方面载体固定化细胞的传质 随后人们相继开展了固定化活细胞或称为固定化增 性能较差 ,外部营养基质和内部代谢产物浓度梯度 殖细胞的研究工作 , 目前已有大量的研究工作发表 , 较大 ,致使其整体活性较低 ;另一方面生物反应器中 几乎覆盖了所有的微生物发酵工艺 ,而且近年来还 流体流动的冲刷和代谢过程内部产生气体的胀裂还 开展了固定化动植物细胞生产次级代谢产物的研究 会造成载体固定化细胞的破裂 ,影响其连续使用的 工作[3 ] 。与游离细胞过程相比, 固定化细胞过程具 寿命 。 有如下几方面的突出优点 : ⑤在经济方面 ,载体材料的使用和不断消耗带 ①生物反应器中可以获得极高的菌体浓度 , 因 来了附加成本 ,使固定化细胞技术难以在传统的发 而连续发酵的稀释速率可以大大提高 ,反应器的设 酵工业中推广应用 。 备生产强度得以强化 。 因此 ,载体固定化细胞技术虽然已有近四十年 ②产物分离纯化过程中菌体从发酵液中的分离 的研究历史 ,真正实现大规模工业化应用成功的实 十分容易。 例却不多 。 ③固定化细胞可以重复或长期使用 ,这样既能 1 　无载体固定化细胞技术的概念及特点 够简化游离细胞过程需要不断培养菌体的操作 ,又 减少了营养基质的浪费; 人们早 已发现 , 某些微生物细胞具有 自絮凝 传统的固定化细胞技术均使用各种载体材料 , ( Self -