ImageJWestern量化拿走不谢.pdfVIP

ImageJ实用技巧之 Western blot 量化 原创 2016-05-26 李莫愁博士 实验万事屋 ImageJ 对医学生来讲最常用的功能是 WesternBlot 量化和细胞计数， 又以前者最 常见。不是所有的 WB 都需要量化， 看审稿人的要求， 好了，今天内容比较枯燥， 我们一步一步来学习 image J 量化Western blot 的条带吧！ 首先下载安装 Image J, 温馨提示软件在网上有下载。 安装完 image J ，打开一张要量化的图片如下图： 点击选择方形选框工具，按住左键，在图片上拖动，选择需要分析的条带区域， 如图中黄色方框所示。 依次选择，如下图， Select First Lane 选项后会出现以上对话框，直接点击 Yes 即可： 当选区出现 1表示选择成功： 然后选择， Analyze →Gels →Plot Lanes ，就会弹出山峰样的图。 峰的面积即灰度值，但是这几个峰连在了一起要先把他们分开，点击直线工具， 画直线。 点击选择魔棒工具， 然后分别点击每个峰的下方区域， 然后就会弹出各个峰面积 的结果，分别与六个条带的灰度值相对应， 表示六个条带所代表的目的蛋白的表 达水平。 使用同样的方法也可以对 beta-actin 进行量化，最后通过标准化计算得到该 Western Blot 的量化结果，至于如何将量化结果变成审稿人要求的柱状图，就留 给你们自己思考。